[發明專利]可標記深紅熒光活性酯

在審

• 申請號: 201611113245.0
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN108147992A
• 公開（公告）日: 2018-06-12
• 發明（設計）人: 李聰;張云飛;李卓昀
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C07D209/18
• 分類號: C07D209/18;C07D403/14;C09K11/06;C09B23/12;A61K49/00;G01N21/64;C07K1/13
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

1.可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B，其通式如下：

IR640B和IR640B-NHS

其中，IR640為花菁類深紅熒光基團；B為熒光基團仲位通過碳-碳鍵引入的芳香基團；NHS為N-羥基琥珀酰亞胺酯。

2.如權利要求1所述的可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B，，其結構式如下：

其中，R₁為H，鹵素，烷基，芳香基，硝基，磺酸基，醛基或羧基；

R₂為H，羧基，或者磺酸基；

n是1，2，3，4，5，6，7或8。

3.如權利要求2所述的可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B，其特征在于，所述的鹵素選自氯或溴或碘。

4.如權利要求2所述的可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B，其特征在于，所述的烷基選自甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基或異丁基。

5.如權利要求2所述的可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B，其特征在于，所述的芳香基選自苯基，萘基或取代苯基。

6.如權利要求1或2所述的可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B的制備方法，其特征在于，其包括，以2,3,3-三甲基吲哚為母體，與丁磺酸內脂等原料反應，合成帶磺酸基的花菁類熒光基團；再通過Suzuki-Miyaura反應，將苯基羧酸通過碳-碳鍵(C-C鍵)引入到熒光基團中；再通過對苯基羧酸修飾，生成N-羥基琥珀酰亞胺酯(NHSester)。

7.按權利要求6的方法，其特征在于，其包括步驟：

熒光基團骨架IR640的合成：

1).

2).

3).

目標深紅熒光基團IR640B的合成：

4).

目標活性酯IR640B-NHS的合成：

5).

步驟1：在乙醇中，苯胺與粘溴酸發生加成反應；

步驟2：若R₂為磺酸基，則2,3,3-三甲基吡啶與1,4-丁磺酸內酯在鄰二氯苯中發生取代反應，若R₂為烷基,羥基或者羧基，則2,3,3-三甲基吡啶與碘代的羧酸或者醇以及碘代的烷烴在乙腈中發生取代反應；

步驟3：步驟1制得的產物和步驟2制得的產物在醋酸酐中于60-90℃下，由醋酸鈉催化發生加成反應制得IR640骨架；

步驟4：步驟3制得的IR640骨架在水中由四三苯基磷鈀催化與對羧基苯硼酸發生suzuki反應制得IR640B；

步驟5：步驟4制得的IR640B在無水DMF中，在EDC活化下與NHS發生酯化反應，制得IR640B-NHS。

8.按權利要求7的方法，其特征在于，所述步驟2中：2,3,3-三甲基吡啶包含5位被R₁取代的和未取代的。

9.如權利要求1所述的所述的可對生物分子進行快速標記的活性深紅熒光活性酯IR640B-NHS及其前體IR640B，其特征是所述的活性酯在生理中性條件下與目標分子中的伯氨基反應，將深紅熒光基團通過生物穩定的酰胺鍵標記到目標分子上。