[發明專利]一種五小葉槭的組培快繁方法

在審

• 申請號: 201611110432.3
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN108142284A
• 公開（公告）日: 2018-06-12
• 發明（設計）人: 栗丹;曹亞瓊;鄧亨寧;劉少奎;曾俊;李飛;羅琳
• 申請（專利權）人: 四川七彩林業開發有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王學強;羅滿

本發明公開一種五小葉槭的組培快繁方法，包括以下步驟：(1)外植體選取及滅菌：取五小葉槭枝條清洗，滅菌，切取帶芽莖段得到外植體；(2)初代培養：將所述步驟(1)得到的外植體接種到初代培養基中進行初代培養，誘導腋芽生成；(3)繼代培養：將所述步驟(2)得到的腋芽接種到到增殖培養基中進行繼代培養，誘導不定芽生成；(4)生根培養：繼代培養：將所述步驟(3)得到的不定芽接種到生根培養基中進行生根培養，得到生根苗。所用培養基配方簡單，組培流程簡便，培養時間短，增殖頻率高，降低了人工成本，易于操作，可進行產業化生產。

技術領域

本發明涉及植物組培育苗技術領域，具體涉及一種五小葉槭的組培快繁方法。

背景技術

五小葉槭(Acer pentaphyllum Diels)是槭樹科槭屬落葉喬木，是我國特有的國家一級保護植物。分布僅限于四川雅礱江及其支流(木里、九龍、卡拉和麥地龍)海拔2200～3000m的河谷地帶。人畜活動嚴重威脅到五小葉槭的生存，按照世界自然保護聯盟(IUCN)瀕危等級標準(IUCN 1994)，已屬于極危物種，面臨滅絕的邊緣，急需搶救性保護。五小葉槭對研究槭樹科植物的起源和演替具有非常重要的意義，同時也是不可多得的城鎮園林景觀樹種。

目前，對五小葉槭的繁育方式研究主要為種子繁殖育苗技術。該方法繁殖時間較長，材料成本較高，大量繁殖存在一定的局限性。

發明內容

有鑒于此，本申請提供一種五小葉槭的組培快繁方法，所用培養基配方簡單，組培流程簡便，培養時間短，增殖頻率高，幼苗整齊，便于后期統一的移栽和種植管理，降低了人工成本，能保證所長出的幼苗植株在形狀上的一致性，易于操作，可進行產業化生產。

一種五小葉槭的組培快繁方法，包括以下步驟：

(1)外植體選取及滅菌：取五小葉槭枝條清洗，滅菌，切取帶芽莖段得到外植體；

(2)初代培養：將所述步驟(1)得到的外植體接種到裝有初代培養基的培養瓶中進行初代培養，生成腋芽，初代培養基組成包括：1/2MS基本培養基，附加0.05～0.5mg/L 6-BA、0.02～0.2mg/L TDZ、10～40g/L蔗糖、4～7g/L瓊脂；

(3)繼代培養：將所述步驟(2)得到的腋芽接種到增殖培養基中進行繼代培養，生成不定芽，所述增殖培養基組成包括：WPM基本培養基，附加0.05～0.5mg/L 6-BA，0.2～1.0mg/L CPPU，10～40g/L蔗糖，4～7g/L瓊脂；

(4)生根培養：將所述步驟(3)得到不定芽接種到生根培養基中進行生根培養，得到生根苗，所述生根培養基組成包括：WPM基本培養基，附加0.2～1.0mg/L NAA、10～40g/L蔗糖、4～7g/L瓊脂。

優選的，所述外植體選取及滅菌過程具體：取五小葉槭幼嫩枝條，去除葉片，用酒精振蕩處理30s，無菌水清洗1次，再用升汞振蕩處理6～10min，無菌水清洗3～5次，無菌濾紙吸去水分，剪切成1～2cm的所述帶芽莖段得到所述外植體。

優選的，所述酒精體積百分數為75％。

優選的，所述升汞質量百分數為0.1％。

優選的，所述初代培養過程光照強度為800～1200Lux，光照時間為14h/d.，培養溫度為23～27℃。

優選的，所述初代培養過程光照強度為1000Lux。

優選的，所述初代培養過程培養溫度25℃。

優選的，所述繼代培養過程和所述生根培養過程光照強度為1300～1800Lux，光照時間為14h/d.，培養溫度為23～27℃。

優選的，所述繼代培養過程和所述生根培養過程光照強度為1500Lux。