[發明專利]芋頭莖尖組織培養中外植體消毒培養的方法及植物植株

在審

• 申請號: 201611108543.0
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN106688886A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 董偉清;顏梅新;何芳練;韋紹龍;江文;胡祥紅;高美萍;邱祖楊
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 王闖

技術領域

本發明涉及生物技術領域中植物組織培養技術領域，具體而言，涉及芋頭莖尖組織培養中外植體消毒培養的方法及植物植株。

背景技術

芋[Colocasia esculenta(L.)Schott]，是一種重要的蔬菜和藥用植物,在我國具有悠久的栽培歷史。芋還是迄今發現的耐鹽性最強的蔬菜類作物之一,長期栽培可以降低土壤的鹽漬化程度,對灘涂的開發和利用具有較大的應用價值。

全球芋頭種植面積最大的是非洲，非洲芋頭種植的面積占全球芋頭種植總面積的79.9％；而亞洲種植面積占全球芋頭種植總面積的7.6％，主要種植地點集中在中國、日本、菲律賓、泰國等。中國的檳榔芋產區主要分布在廣西、廣東、海南、福建，湖北、浙江、山東、四川、江西等地，并以多子芋為主，著名品種有廣西荔浦芋、福建福鼎芋、廣東樂昌炮彈芋、靖江香沙芋等。

近幾年，由于種植結構調整和人們對芋頭產品的青睞，芋頭種植面積大幅度提高，出現供需兩旺的勢頭。芋頭是無性繁殖作物，以球莖作為生產用種，農戶常年留種種植，連續栽培易引起病理性和生理性退化。芋頭退化是由病毒侵染并在芋塊內累代積留引起的，表現為產量和品質的明顯降低。大部分病毒不能侵染芋頭莖尖組織，因而通過莖尖組織培養脫毒種芋，將脫毒種芋應用于生產是防止芋頭退化的有效措施。在植物組織培養過程中對植物外植體消毒滅菌的效果是植物組織培養成功的關鍵。污染是造成組織培養失敗的主要原因之一，很多學者在初代培養階段，很難得到無菌苗；或者雖然在初代培養得到了無菌苗，但在繼代培養時往往出現大量污染甚至全部污染。

如何降低成本是提高經濟效益的首要問題，因此,組織培養中降低污染率是工廠化生產中不可忽視的技術環節。在植物組織培養過程中,存在兩種類型的污染：一類是通常所說的污染，即外植體消毒不徹底,無菌操作和培養過程中而導致的污染；另一類是包括真菌和細菌的內源菌污染，這也是造成內源污染的主要原因。外植體污染是組織培養中眾多污染途徑中最難解決的一個。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種芋頭莖尖組織培養中外植體消毒培養的方法，所述方法中，通過在培育過程中，對外植體采用適宜的方法進行消毒，從而能夠有效避免莖尖組織培養中外植體受到污染，同時還能夠保證較高的分生組織誘導率。

本發明的第二目的在于提供一種植物植株，所述植株由本發明方法培育得到。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種芋頭莖尖組織培養中外植體消毒方法，所述方法包括如下步驟：

(1)將從采集的母芋上選取的子芋浸泡于殺菌劑溶液中消毒后，埋于砂床中催芽；

(2)待發出的芽體長至15～20cm后，將子芋從沙盤中取出，并在清洗和除去子芋外皮后，晾干備用；

(3)以酒精擦洗子芋和芽體，然后去除莖尖周圍的葉片和組織，并截取2～3cm的芽體；

將截取的芽體依次用酒精和二氯化汞溶液消毒，然后清洗并干燥；

(4)剝除干燥后的芽體上生長點外圍包裹的葉片；選取生長點上部的組織，并誘導培養。

可選的，本發明中，步驟(1)中所選取的子芋的質量為35～70g。

可選的，本發明中，所述殺菌劑溶液為50％多菌靈可濕性粉劑300～500倍液。

可選的，本發明中，步驟(1)中所述浸泡的時間為15～30min。

可選的，本發明中，步驟(1)中還進一步包括每隔3～5日澆水，并保持沙盤濕潤的步驟。

可選的，本發明中，步驟(3)中所述以酒精擦洗子芋和芽體，是以濃度為75～80％的酒精擦洗子芋和芽體。

可選的，本發明中，步驟(3)中所述依次用酒精和二氯化汞溶液消毒，是以濃度為60～70％的酒精消毒2～3min后，再以二氯化汞溶液消毒6～10min。

可選的，本發明中，所述二氯化汞溶液為溶有吐溫20的濃度為0.1～0.3％的二氯化汞溶液。

可選的，本發明中，所述誘導培養所用培養基為添加有BA、NAA以及2～3％蔗糖的基礎MS培養基；

其中，BA的濃度為2～3mg/L，NAA的濃度為0.1～0.2mg/L。

同時，本發明還提供了由本發明所述方法培養得到的芋頭植株。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：