[發明專利]一種全自動生化分析儀用尿液腦脊液總蛋白檢測試劑

在審

• 申請號: 201611108296.4
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN106990102A
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發明（設計）人: 張建;張義;張曉時
• 申請（專利權）人: 山東大學齊魯醫院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及尿液、腦脊液總蛋白檢測技術領域，具體涉及一種全自動生化分析儀用尿液腦脊液總蛋白檢測試劑。

背景技術

蛋白質是生命新陳代謝不可或缺的重要物質。

腦脊液蛋白質由血液經血腦屏障濾過進入腦室、蛛網膜下腔和脊髓中央管內形成，或中樞神經合成。正常腦脊液總蛋白不大于0.42g/L。當血腦屏障破壞或多發性硬化癥等疾病時，中樞神經自身免疫球蛋白合成增加時，腦脊液總蛋白增加。

正常腎小球電荷屏障及膜屏障作用下，少量白蛋白進入初尿，經過腎小管的重吸收作用，絕大部分蛋白質被重吸收，只有極少量蛋白進入終尿液，排除體外，正常人24尿總蛋白不大于150mg。當腎小球發生病變導致濾過蛋白增加或腎小管病變導致重吸收減少，尿中蛋白質增加，形成蛋白尿。

腦脊液、尿液中的蛋白質含量較低，需要更靈敏的方法測定。臨床常用的檢測腦脊液、尿液總蛋白的方法有

1：比濁法磺基水楊酸-硫酸鈉法、三氯乙酸法等。

2：染料法考馬氏亮藍法、麗春紅S法等。

上述檢測方法的缺點如下：

1、比濁法磺基水楊酸-硫酸鈉法、三氯乙酸法等。該方法抗干擾能力弱，檢測結果準確度差。

2、染料法考馬氏亮藍法、麗春紅S法等，染料與蛋白結合時產生顏色變化，顏色深淺與蛋白質濃度呈正相關，通過與標準曲線比較可以計算出蛋白的濃度。該類方法呈色穩定且靈敏度高。但色素易吸附于器皿，不適于全自動生化分析儀檢測。

發明內容

針對以上問題，本發明提供一種全自動生化分析儀用尿液腦脊液總蛋白檢測試劑，采用丁二酸-苯甲酸鈉緩沖液，并在試劑中加入甲醇，增加了鄰苯三酚紅溶解度、穩定性及靈敏度，采用雙試劑配方，有效解決了尿膽原及乳糜等因素影響，可以有效解決背景技術中的問題。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：一種全自動生化分析儀用尿液腦脊液總蛋白檢測試劑，該試劑由緩沖液R1和顯色液R2兩種試劑組成，其成分如下：

R1：甲醇10-12％

苯甲酸鈉2.5-2.7mmol/L

丁二酸50-54mmol/L

R2：鄰苯三酚紅240-250umol/L

鉬酸鈉140-145umol/L。

優選的，該試劑由緩沖液R1和顯色液R2兩種試劑組成，其成分如下：

R1：甲醇11％

苯甲酸鈉2.6mmol/L

丁二酸52mmol/L

R2：鄰苯三酚紅245umol/L

鉬酸鈉142umol/L。

優選的，該試劑通過顯色液R2中的鄰苯三酚紅與鉬酸形成的紅色復合物，在酸性條件下與蛋白質結合形成藍紫色復合物，吸光度與樣本中的蛋白質含量正相關，通過與標準曲線，計算出蛋白質的濃度。

優選的，所述紅色復合物的最大吸收波長470nm。

優選的，所述藍紫色復合物的最大吸收波長604nm。

優選的，其酸性條件的ph值為2.5。

本發明的有益效果：

本發明采用丁二酸-苯甲酸鈉緩沖液，并在試劑中加入甲醇，增加了鄰苯三酚紅溶解度、穩定性及靈敏度，采用雙試劑配方，有效解決了尿膽原及乳糜等因素影響。

附圖說明

圖1為實施例3中蛋白濃度線性圖。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

實施例1：

本發明提供了一種全自動生化分析儀用尿液腦脊液總蛋白檢測試劑，該試劑由緩沖液R1和顯色液R2兩種試劑組成，其成分如下：

R1：甲醇10％

苯甲酸鈉2.5mmol/L

丁二酸50mmol/L

R2：鄰苯三酚紅240umol/L

鉬酸鈉140umol/L。

該試劑通過顯色液R2中的鄰苯三酚紅與鉬酸形成的紅色復合物，在酸性條件下與蛋白質結合形成藍紫色復合物，吸光度與樣本中的蛋白質含量正相關，通過與標準曲線，計算出蛋白質的濃度；所述紅色復合物的最大吸收波長470nm；所述藍紫色復合物的最大吸收波長604nm；其酸性條件的 ph值為2.5。

實施例2：