[發(fā)明專利]基于納米銀催化的比色和電化學雙通道核酸適配體傳感器

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611107216.3
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN108152349B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發(fā)明（設計）人: 宋偉;朱超云;賴慶菁
• 申請（專利權(quán)）人: 南京科技職業(yè)學院
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N33/68
• 代理公司: 南京北辰聯(lián)和知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32350
• 代理人: 何美琴

1.基于納米銀催化的比色和電化學雙通道核酸適配體傳感器，實現(xiàn)對PDGF-BB的測定，其特征在于：將PDGF-BB核酸適配體固定在多孔酶標板孔中，加入靶標PDGF-BB，形成適配體與蛋白的復合物后加入PDGF-BB核酸適配體修飾的納米銀探針；加入探針反應后加入反應底物；納米銀催化反應完成后實現(xiàn)雙通道檢測；通道1采用分光光度法，在最大吸收波長下檢測底物體系吸光度，利用比色法讀取吸光度值可測定樣品含量；通道2采用電化學檢測方法，可直接向孔中加入還原態(tài)氧化石墨烯作為電解質(zhì)，將印刷電極插入其中進行電沉積，完成后將電極置于電解質(zhì)溶液，檢測電極表面形成的納米復合物的放大的電化學信號，實現(xiàn)靶標的定量測定；

納米銀可以催化硼氫化鈉和鄰硝基苯酚之間的反應，其中，硼氫化鈉和鄰硝基苯酚的體積比為1：1，硼氫化鈉的摩爾濃度為50mmol/L，鄰硝基苯酚的摩爾濃度為200mmol/L；在納米銀的催化作用下，硼氫化鈉將黃色的鄰硝基苯酚還原成無色的鄰氨基苯酚；

直接向催化反應完成后的各孔中加入2mg/mL還原態(tài)氧化石墨烯作為電解質(zhì)，將印刷電極插入其中進行電沉積，用循環(huán)伏安法在－0.3V至1.3V范圍內(nèi)掃描20圈；完成后檢測電極表面形成的納米復合物的放大的電化學信號，以0.1mol/L的鹽酸溶液為電解質(zhì)，記錄－0.3V至0.4V范圍內(nèi)示差脈沖伏安曲線，檢測信號為峰電流值，以標準曲線法對PDGF-BB的進行定量測定。

2.如權(quán)利要求1所述的傳感器，其特征在于：用波長為423nm的可見分光光度計分別讀取PDGF-BB標準品和試樣反應孔中的溶液的吸光度值，并分別計算標準品孔與空白樣品孔吸光度值之間的差值⊿A_標準；試樣孔與空白樣品孔吸光度值之間的差值⊿A_試樣；采用直接比較的方法可計算出試樣中PDGF-BB的含量。