[發(fā)明專利]人員防護(hù)裝備防護(hù)性能評價用細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611097376.4
• 申請日: 2016-12-02
• 公開（公告）號: CN106755278B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 隋志偉;王晶;劉曉夏;薛蕾
• 申請（專利權(quán)）人: 中國計量科學(xué)研究院
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12Q1/06;C12N1/04;C12R1/43
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129
• 代理人: 張濤

本發(fā)明公開了一種人員防護(hù)裝備微生物防護(hù)性能評價用細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其制備方法。該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由含粘質(zhì)沙雷氏菌菌體和保護(hù)劑的凍干物以及用于菌體凍干物復(fù)水的穩(wěn)定劑水溶液組成。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具有良好的均勻性和穩(wěn)定性，在用于人員防護(hù)裝備防護(hù)性能評價中使用方便，可以節(jié)省人力和時間，大大提高人員防護(hù)裝備防護(hù)性能評價效率。本發(fā)明還提供了該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方法，可以確保粘質(zhì)沙雷氏菌活菌濃度精確，提高了人員防護(hù)裝備性能評價的準(zhǔn)確性。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種用于評價人員防護(hù)裝備防護(hù)性能的細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其制備方法，屬于生物安全技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

人員防護(hù)裝備和設(shè)施在隔離傳染源，阻斷微生物氣溶膠的傳播途徑和保護(hù)易感人群三方面均發(fā)揮著重要作用，生物安全柜、生物防護(hù)口罩、生物防護(hù)服等，都是防護(hù)和阻斷呼吸道傳染病病原傳播感染最有效的常用人員防護(hù)裝備。在這些防護(hù)裝備的性能評價中，微生物防護(hù)性能評價最為關(guān)鍵。

粘質(zhì)沙雷氏菌是一種傳統(tǒng)的空氣生物學(xué)模式菌，其粒譜集中在3.3-0.65μm。經(jīng)過很多學(xué)者研究表明，粘質(zhì)沙雷菌具有典型的菌落顏色、耐霧化能力強(qiáng)、容易消毒避免對環(huán)境造成污染等優(yōu)點(diǎn)，適合作為生物檢測指示菌，應(yīng)用于生物安全柜等人員防護(hù)裝備的防護(hù)性能評價中。

但是，在人員防護(hù)裝備防護(hù)性能測試的實(shí)際現(xiàn)場實(shí)驗(yàn)中，檢驗(yàn)人員往往只能根據(jù)工作經(jīng)驗(yàn)配制指示細(xì)菌懸液，很難保證其量值完全一致。此外，配制指示細(xì)菌懸液的過程比較繁瑣，而且浪費(fèi)大量人力、物力和時間，從而大大影響了評價結(jié)果的準(zhǔn)確性和評價工作的效率。因此，為保證人員防護(hù)裝備防護(hù)性能評價的準(zhǔn)確性和可比性，非常有必要制備一種人員防護(hù)裝備防護(hù)性能評價用細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種人員防護(hù)裝備微生物防護(hù)性能評價的細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以及所述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法。

為實(shí)施上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種人員防護(hù)裝備微生物防護(hù)性能評價用細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其特征在于，包括有粘質(zhì)沙雷氏菌。

所述粘質(zhì)沙雷氏菌用2mL穩(wěn)定劑水溶液復(fù)水后，粘質(zhì)沙雷氏菌活菌濃度為0.5×10¹⁰～5.0×10¹⁰CFU/mL。

所述的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，由兩個組分組成：

1)粘質(zhì)沙雷氏菌，為含粘質(zhì)沙雷氏菌菌體和菌體保護(hù)劑的凍干物；

2)用于菌體凍干物復(fù)水的穩(wěn)定劑水溶液。

所述菌體保護(hù)劑，其成分選自葡萄糖、明膠、卵黃中的一種或多種；

所述凍干物優(yōu)選為餅狀或球狀；

所述穩(wěn)定劑水溶液含無機(jī)鹽、牛血清白蛋白和抗壞血酸。

制成所述菌體保護(hù)劑的原料組成為：葡萄糖0～10重量份，明膠0～10重量份，卵黃0～10重量份；優(yōu)選的組成為：葡萄糖5～7重量份，明膠1～2重量份，卵黃2～3重量份。

所述穩(wěn)定劑水溶液中各成分的質(zhì)量體積百分比：0.1～1.0％的氯化鈉、0.1～1.0％的牛血清白蛋白和0.2～2％的抗壞血酸，其余是水。

上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法，其特征是，用生理鹽水將粘質(zhì)沙雷氏菌菌體稀釋至10¹⁰級，將配制成新鮮菌勻液與保護(hù)劑按照1:1的體積比混合，于-70℃下預(yù)凍4h后凍干，得到所述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

所用的粘質(zhì)沙雷氏菌的培養(yǎng)方法是：挑取單菌落于已高壓滅菌的營養(yǎng)肉湯中，30℃±1℃下，180×g搖床培養(yǎng)12h。

制備得到的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于-20℃下保存。

所述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方法，為營養(yǎng)瓊脂平板涂布法，具體操作如下：