[發明專利]一種溶菌酶PLGA微球的制備方法

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• 申請號: 201611096061.8
• 申請日: 2016-12-02
• 公開（公告）號: CN106727425A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 郝青
• 申請（專利權）人: 陜西環珂生物科技有限公司
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/34;A61K38/47
• 代理公司: 西安億諾專利代理有限公司61220
• 代理人: 賈苗苗

技術領域

本發明屬于材料制備領域，尤其涉及一種溶菌酶PLGA微球的制備方法。

背景技術

隨著生物科技發展,蛋白、多肽類藥物快速呈現,當前已有多種生物技術藥物上市。凍干粉針類制劑是這類藥物的傳統劑型,盡管其療效確切,但在體內容易被降解,半衰期短,需要頻繁注射給藥。

SPG 膜乳化法 是一種新型乳化法,其原理是在分散相上施加一定大小的壓力使其通過孔徑均勻的微孔玻璃膜即SPG 膜后分散為粒徑較均一的液滴,通過不斷流動的連續相沖刷,當液滴直徑達到從膜表面剝離的臨界值即壓力達到臨界壓力之上,即可形成一個均勻粒徑的乳液液滴。之后再結合溶劑揮發法即可制備出微球,其粒徑可由SPG 膜孔徑來控制。此法乳化條件溫和、制備過程不易使藥物變性且制備出的微球單分散性較好。

發明內容

本發明旨在解決上述問題，提供一種溶菌酶PLGA微球的制備方法。

本發明的技術方案為：

一種溶菌酶PLGA微球的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將40mg溶菌酶溶解于200μl、pH7.4的PBS液中，形成內水相；

（2）取PLGA溶于5ml二氯甲烷中形成有機相；

（3）將內水相加入有機相中,用超聲細胞破碎儀在冰浴條件下進行初乳化，初乳液即膜乳化法中的分散相在氮氣壓力下通過SPG膜,被壓入1%聚乙烯醇外水相中,400rpm轉速下攪拌,使有機溶劑完全揮發,得固化微球；

（4）用去離子水離心洗滌3次,即得溶菌酶PLGA微球。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述溶菌酶微球載藥量為11.84%。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述溶菌酶微球的包封率為72.4%。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述溶菌酶微球的粒徑為63-65μm。SPG 膜乳化法制備微球的一大特點，制備方式溫和，制備過程的乳滴碰撞較少，因此形貌圓整無粘連。通過粒度分析，證明微球的平均粒徑為63.89μm，徑距為0.675。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述攪拌時間為4-4.5h。

本發明的技術效果在于：

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，以溶菌酶為模型藥物,制備微球,比較制備過程中處方因素對微球性質的影響,并對所制得的微球進行理化性質、微球的體內相容性和降解特性，乳化條件溫和、制備過程不易使藥物變性且制備出的微球單分散性較好，且本發明所述的制備方法工藝簡單，易于操作，適于推廣應用。

具體實施方式

實施例1

一種溶菌酶PLGA微球的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將40mg溶菌酶溶解于200μl、pH7.4的PBS液中，形成內水相；

（2）取PLGA溶于5ml二氯甲烷中形成有機相；

（3）將內水相加入有機相中,用超聲細胞破碎儀在冰浴條件下進行初乳化，初乳液即膜乳化法中的分散相在氮氣壓力下通過SPG膜,被壓入1%聚乙烯醇外水相中,400rpm轉速下攪拌,使有機溶劑完全揮發,得固化微球；

（4）用去離子水離心洗滌3次,即得溶菌酶PLGA微球。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述溶菌酶微球載藥量為11.84%。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述溶菌酶微球的包封率為72.4%。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述溶菌酶微球的粒徑為63-65μm。SPG 膜乳化法制備微球的一大特點，制備方式溫和，制備過程的乳滴碰撞較少，因此形貌圓整無粘連。通過粒度分析，證明微球的平均粒徑為63.89μm，徑距為0.675。

本發明所述的溶菌酶PLGA微球的制備方法，所述攪拌時間為4h。

采用激光粒度分析儀干法測定微球的粒徑及其度分布情況。采用差示掃描量熱儀考察微球的相轉變溫度。分別稱取5 mg 的溶菌酶粉末、空白微球、溶菌酶粉末與空白微球的物理混合物以及載溶菌酶微球,在20℃-200℃范圍內,以氮氣為載氣,以10℃的速度升溫,分別測定各個樣品的。采用傅里葉變換紅外光譜儀對溶菌酶微球進行表征。分別掃描溶菌酶、空白微球、溶菌酶與空白微球的物理混合物、溶菌酶載藥微球。