[發(fā)明專利]一種蘋果疏除幼果原花青素組分高效提取方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611073419.5 | 申請日: | 2016-11-29 |
| 公開(公告)號: | CN106699719B | 公開(公告)日: | 2019-04-09 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 張軒銘;韓利文;侯海榮;張姍姍;李曉彬;劉可春;陳玉峰;于濤;孫博;隋曉明;呂憲峰;魏新賽;隋莎莎 | 申請(專利權(quán))人: | 蓬萊海洋(山東)股份有限公司;山東省科學(xué)院生物研究所 |
| 主分類號: | C07D311/62 | 分類號: | C07D311/62 |
| 代理公司: | 濟(jì)南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219 | 代理人: | 張宏松 |
| 地址: | 265607 山東省煙*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 原花青素 幼果 疏除 蘋果 高效提取 抑制腫瘤細(xì)胞增殖 高值化利用 凝膠柱層析 體內(nèi)自由基 無毒副作用 單方制劑 蛋白沉淀 工藝操作 工藝結(jié)合 功能活性 酶解技術(shù) 蘋果資源 組分化學(xué) 工藝流程 活性高 復(fù)配 花青 制備 挖掘 保留 | ||
1.一種蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,包括步驟如下:
1)提取液的制備:以清洗干凈的蘋果疏除幼果為原料,加水打成果漿,向果漿中加入復(fù)合植物水解酶和纖維素酶進(jìn)行雙酶酶解,雙酶酶解后得到的酶解液進(jìn)行醇沉,獲得原花青素粗提液;所述的復(fù)合植物水解酶為復(fù)合植物水解酶Viscozyme L;
2)解析液的制備:將步驟1)獲得的原花青素粗提液濃縮至無醇味,加入粗提液重量8~20倍的水稀釋后,加入明膠使明膠濃度達(dá)到3~8 mg/mL進(jìn)行絡(luò)合反應(yīng)4~8 h,反應(yīng)后過濾,收集沉淀物,沉淀物以水為解析液進(jìn)行攪拌解析,離心,收集上清液,得解析液;
3)精制原花青素:解析液濃縮后,上樣至Sephadex LH-20凝膠層析柱進(jìn)行純化,收集合并在紫外波長下有吸收的部分,減壓濃縮、真空干燥,得到蘋果原花青素提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,水的加入量與蘋果疏除幼果質(zhì)量比為:(8~15):1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,復(fù)合植物水解酶和纖維素酶的加入量占果漿總質(zhì)量的0.5%~3.0%,植物復(fù)合水解酶與纖維素酶的質(zhì)量比為1 : 1 ~ 1 : 3.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,復(fù)合植物水解酶和纖維素酶的加入量占果漿總質(zhì)量的0.5%~2.0%,植物復(fù)合水解酶與纖維素酶的質(zhì)量比為1 : 1.5 ~ 1 : 3。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,步驟1)所述的酶解條件為:酶解溫度30~50 ℃,酶解時(shí)間為80 ~ 150 min, pH值為4~6。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,步驟1)中醇沉加入乙醇進(jìn)行醇沉,加入乙醇后乙醇最終的質(zhì)量濃度為50%~80%,醇沉?xí)r間8~16 h。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,步驟2),水的加入量為粗提液重量的10~15倍,加入明膠使明膠濃度達(dá)到4~6.5 mg/mL進(jìn)行絡(luò)合反應(yīng)5~7 h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,步驟2)中解析溫度為40~60 ℃,解析時(shí)間60~120 min,離心速度為3000~6000 rpm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,步驟3)解析液濃縮至1/10~1/20,濃縮條件:溫度50~60 ℃,真空度0.1~0.15 mbar。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果疏除幼果原花青素組分提取方法,其特征在于,步驟3)采用無水乙醇進(jìn)行洗脫雜質(zhì),步驟3)洗脫液收集部分為在紫外波長為200~400 nm有吸收的部分。
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