[發明專利]一種高效快速誘導梅花愈傷組織形成的培養基

在審

• 申請號: 201611072175.9
• 申請日: 2016-11-29
• 公開（公告）號: CN106718885A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 覃永紅
• 申請（專利權）人: 廣西南岜仔科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司11340
• 代理人: 但玉梅

技術領域

本發明屬于植物組織培養領域，具體涉及一種高效快速誘導梅花愈傷組織形成的培養基。

背景技術

梅花，是中國的傳統名花，在我國有7000年以上的應用史和3000年以上的栽培史，品種繁多，在引種栽培過程中，培育出了眾多優良的園藝新品種，極大地豐富了我國的園林景觀。梅花從受粉到果實成熟僅要兩三個月左右的時間，果實發育時間短，其果實達到成熟時，胚尚未成熟。種子經過砂藏處理，在正常條件下播種萌發率也很低。愈傷組織培養不僅是一種植物快繁的新手段，同時也是植物改良，種質保存和有用化合物生產的理想途徑，梅花為木本植物，其愈傷組織的誘導比較困難，組織培養過程中常出現褐變、菌絲感染及誘導時間長等的問題。

公開號為CN 102550404 A、申請號為201110422216.3的中國專利提供了一種梅花葉片愈傷組織高效誘導方法，該發明中詳細介紹了梅花葉片愈傷組織的誘導培養基成分及誘導培養過程，但外植體培養過程往往會出現褐變、菌絲感染等的問題，從而影響愈傷組織的質量及誘導率，該發明出沒有提供詳細的解決方法。

發明內容

本發明的發明目的是，針對現有技術中沒有提供詳細方法以解決外植體培養過程出現褐變、菌絲感染等的問題，提供一種能解決褐變及菌絲感染等問題，從而提高梅花葉片愈傷組織的質量及誘導率的方法。

為達到上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一種高效快速誘導梅花愈傷組織形成的培養基，按重量份比，包括以下物質：MS培養基90-120份、母液I18-28份和純凈水15-25份；所述母液I溶液包括以下質量-體積濃度的物質：亞硫酸鉀1-5mg/L、氟苯丙氨酸1-5mg/L、甲硫基異戊烯基腺苷2-6mg/L、4-碘苯氧乙酸3-7mg/L和噻菌銅2-6mg/L。

在本發明中，進一步的說明，按重量份比，包括以下物質：MS培養基100-110份、母液I20-26份和純凈水17-23份；所述母液I溶液包括以下質量-體積濃度的物質：亞硫酸鉀2-4mg/L、氟苯丙氨酸2-4mg/L、甲硫基異戊烯基腺苷3-5mg/L、4-碘苯氧乙酸4-6mg/L和噻菌銅3-5mg/L。

在本發明中，進一步的說明，按重量份比，包括以下物質：MS培養基105份、母液I24份和純凈水19份；所述母液I溶液包括以下質量-體積濃度的物質：亞硫酸鉀3mg/L、氟苯丙氨酸3mg/L、甲硫基異戊烯基腺苷3mg/L、4-碘苯氧乙酸5mg/L和噻菌銅4mg/L。

在本發明中，進一步的說明，所述母液I的配制方法如下：先按重量份比稱取稱取亞硫酸鉀、氟苯丙氨酸、甲硫基異戊烯基腺苷、4-碘苯氧乙酸和噻菌銅；接著，將亞硫酸鉀、氟苯丙氨酸、甲硫基異戊烯基腺苷、4-碘苯氧乙酸和噻菌銅分別加入部分純凈水中，充分攪拌至上述物質充分溶解，然后放冷至室溫，定容至所需溶劑即得母液I。

在本發明中，進一步的說明，所述的高效快速誘導梅花愈傷組織形成的培養基的制備方法，包括以下步驟：

(1)按重量份比，稱取MS培養基和純凈水，先將純凈水加入鍋中，加熱使純凈水煮沸后停止加熱，接著將MS培養基加入純凈水中，使MS培養基溶解，并充分攪拌、混合均勻，此為體系1；

(2)按重量份比稱取母液I，將母液I加入體系1中，不斷攪拌使體系1和母液I混合均勻，此為體系2，調節體系2的pH值，此為體系3；

(3)取體系3，用高壓蒸汽滅菌18-28min，然后取出，靜置冷卻凝固后即得培養基。

在本發明中，進一步的發明，所述調節體系2的pH值為5.4-6.4之間。

在本發明中，進一步的說明，所述高壓蒸汽滅菌，滅菌壓力為170-190KPa。

本發明與現有技術相比較具有的有益效果：

本發明具有促使梅花愈傷組織快速形成，有減少褐變產生及菌絲感染的問題，從而提高梅花葉片愈傷組織的質量及誘導率，研究發現，經使用本發明的培養基進行誘導梅花葉片愈傷組織，誘導時間縮短至6天，誘導率高達98.5％,褐變率僅為1.2％，愈傷組織緊密，顏色淺綠而透明，呈現出很好的狀態。