[發(fā)明專利]一種反硝化菌的保藏方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611072026.2 | 申請日: | 2016-11-29 |
| 公開(公告)號: | CN108117993B | 公開(公告)日: | 2021-05-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 孫丹鳳;高會杰;郭志華;趙勝楠;李寶忠;陳明翔 | 申請(專利權(quán))人: | 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司撫順石油化工研究院 |
| 主分類號: | C12N1/04 | 分類號: | C12N1/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100728 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 硝化 保藏 方法 | ||
1.一種反硝化菌的保藏方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)將反硝化菌培養(yǎng)至穩(wěn)定生長期,并收集菌體;
(2)配制保藏營養(yǎng)液,主要包括碳源、氮源和微量物質(zhì);
(3)步驟(1)反硝化菌與步驟(2)保藏營養(yǎng)液混合,加入適量保藏助劑,所述保藏助劑包括糖脂、糖醇和有機酸鹽;以重量份計,糖脂含量為0.5-15重量份,糖醇含量為0.5-15重量份,有機酸鹽為5-30重量份;
(4)低溫冷凍保藏。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:保藏助劑中,所述糖脂為海藻糖脂、槐糖脂和鼠李糖脂中的至少一種;糖醇選自甘露醇、木糖醇、乳糖醇、核糖醇、半乳糖醇、肌醇和赤蘚醇中的一種或幾種;有機酸鹽為乙酸鈉、琥珀酸鈉和檸檬酸鈉中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于:保藏助劑中,糖脂為內(nèi)酯型槐糖脂,糖醇為乳糖醇,有機酸鹽為乙酸鈉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:保藏助劑的使用量按照保藏體系中保藏劑濃度為0.01-3.0mg/L進(jìn)行投加。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)的反硝化菌培養(yǎng)采用SBR法,培養(yǎng)液采用人工配制的培養(yǎng)液或者實際廢水,培養(yǎng)液所含氮源為硝酸鹽氮和/或亞硝酸鹽氮,氮源濃度為100~800mg/L;所含碳源為甘油或甲醇,濃度以COD計為1000~5000mg/L,還含有少量Fe2+、Mg2+、K+、Ca2+以及磷酸根離子。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的方法,其特征在于:步驟(1)反硝化菌培養(yǎng)條件為:溫度15~40℃,pH為7.0~8.5,溶解氧濃度低于1mg/L,攪拌轉(zhuǎn)速10~50rpm,培養(yǎng)3~10天至穩(wěn)定生長期。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)保藏營養(yǎng)液中碳源為甘油,氮源為硝酸鹽氮和/或亞硝酸鹽氮,硝酸鹽為NaNO3和/或KNO3,亞硝酸鹽為NaNO2,微量物質(zhì)為FeSO4、KH2PO4、MgCl2和CaCl2。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于:步驟(3)反硝化菌與保藏營養(yǎng)液混合物中,甘油濃度以COD 計為0.5~3.0g/L,NO3--N和/或NO2--N濃度為 0.2~0.8g/L,F(xiàn)e2+濃度為0.01~0.06g/L,K+濃度為0.05~0.5g/L,Ca2+濃度為0.01 ~0.1g/L,Mg2+濃度為0.05~0.5g/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(4)低溫冷凍溫度為-10℃~-70℃。
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