[發(fā)明專利]一種綿羊肺炎支原體低血清高效培養(yǎng)基及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611071308.0
• 申請日: 2016-11-29
• 公開（公告）號(hào): CN106635895B
• 公開（公告）日: 2019-07-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳勝利;儲(chǔ)岳峰;郝華芳;趙萍;劉永生
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;A61P11/00;C12R1/35
• 代理公司: 北京中恒高博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11249
• 代理人: 姜司晨

1.一種綿羊肺炎支原體低血清高效培養(yǎng)基，其特征在于，每1000ml低血清高效培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和輔助培養(yǎng)基組成；

所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基中含有以下組分：

（1）MEM6.0～7.0 g，

（2）丙酮酸鈉5.0～6.0 g，

（3）葡萄糖5.0～6.0 g，

（4）質(zhì)量濃度為1%的酚紅2.0～2.5 ml，

（5）Hank’s液 500 ml，

（6）去離子水300 ml；

所述輔助培養(yǎng)基中含有以下組分：

（7）質(zhì)量濃度為25%的新鮮酵母浸出液 30～50 ml，

（8）質(zhì)量濃度為3%的L-谷氨酰胺16～17 ml，

（9）質(zhì)量濃度為10%的L-半胱氨酸4.0～6.0 ml，

（10）質(zhì)量濃度為15%的水解乳蛋白 32.0～35.0 ml，

（11）10 mg/ml的轉(zhuǎn)鐵蛋白 0.8～1.5ml，

（12）10 mg/ml的胰島素 0.8～1.5 ml，

（13）2mg/ml的小牛胸腺DNA 8.0～10.0 ml，

（14）20萬IU/ml的青霉素 0.25 ml，

（15）無菌馬血清50 ml。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊肺炎支原體低血清高效培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基的制備：

取權(quán)利要求1所述的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分中的（1）-（5）逐一加入300ml去離子水（6）中，充分混合，115℃高壓滅菌20min后冷卻至室溫備用；

2）輔助培養(yǎng)基的制備：

取經(jīng)0.22 微米濾膜濾過除菌的權(quán)利要求1所述的（7）-（15）成分，充分混合，即得輔助培養(yǎng)基；

3）混合定容：

無菌條件下，將步驟1）得到的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和步驟2）得到的輔助培養(yǎng)基混合，用滅菌水補(bǔ)齊定容至1000ml，用滅菌的1M NaOH調(diào)pH值到7.2-7.4，充分搖勻，分裝后置4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊肺炎支原體低血清高效培養(yǎng)基在培養(yǎng)綿羊肺炎支原體中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綿羊肺炎支原體低血清高效培養(yǎng)基在制備綿羊肺炎支原體疫苗抗原中的應(yīng)用。