[發(fā)明專利]一種玉米MS8基因突變體及其分子鑒定方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611064810.9
• 申請(qǐng)日: 2016-11-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106754954B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃培勁;李新鵬;李京琳;張維;安保光;龍湍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南波蓮水稻基因科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/29
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;C07K14/415;C12Q1/68;C12N15/11;A01H6/46
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

1.一種玉米MS8基因突變體ms8-4505，其在玉米MS8基因編碼區(qū)第814位，即基因組序列中起始密碼子起第1302位堿基，T突變?yōu)镃，

其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其編碼的蛋白序列如SEQ IDNo.2所示。

2.含有權(quán)利要求1所述MS8基因突變體ms8-4505的表達(dá)載體。

3.含有權(quán)利要求2所述表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。

4.權(quán)利要求1所述的玉米MS8基因突變體ms8-4505在制備轉(zhuǎn)基因植物中的應(yīng)用。

5.權(quán)利要求1所述的玉米MS8基因突變體ms8-4505在制備隱性雄性核不育的轉(zhuǎn)基因玉米中的應(yīng)用。

6.權(quán)利要求1所述的玉米MS8基因突變體ms8-4505在玉米改良育種、制種中的應(yīng)用。

7.一種分子標(biāo)記在制備隱性雄性核不育的轉(zhuǎn)基因玉米中的應(yīng)用，所述分子標(biāo)記是由以下一組引物、以玉米基因組為模板，同時(shí)擴(kuò)增得到，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過(guò)瓊脂糖電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物；所述引物的核苷酸序列為：

上游引物4505_F1：GACGCGCCCGAGGGTGT；

下游引物4505_R1：ACTCTGGCTCGTGGTACTTGACTCCT；

下游引物4505_R2：GACTTCATGCAGCCGACGTG；

上游引物4505_F2：CCAAGACCAGGACCTACTTCACCACC。

8.檢測(cè)權(quán)利要求1所述的玉米Ms8基因突變體ms8-4505的方法，其特征在于，通過(guò)下述引物對(duì)擴(kuò)增待檢植物基因組DNA，并檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物：

所述引物對(duì)的核苷酸序列為：

上游引物4505_F1：GACGCGCCCGAGGGTGT；

下游引物4505_R1：ACTCTGGCTCGTGGTACTTGACTCCT；

下游引物4505_R2：GACTTCATGCAGCCGACGTG；

上游引物4505_F2：CCAAGACCAGGACCTACTTCACCACC。

如果用上述引物對(duì)擴(kuò)增出的產(chǎn)物為501bp和191bp，則標(biāo)志著該待檢植物MS8基因型為野生型；如果擴(kuò)增產(chǎn)物為501bp和247bp，則標(biāo)志著該待檢植物MS8基因型為ms8-4505突變體；如果擴(kuò)增產(chǎn)物為501bp、247bp和191bp三條帶型，則標(biāo)志著該待檢植物MS8基因型為野生型和ms8-4505突變體的雜合基因型。