[發明專利]一種利用分子標記輔助選育中等粒重類型水稻的方法

有效

• 申請號: 201611060343.2
• 申請日: 2016-11-23
• 公開（公告）號: CN106755325B
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發明（設計）人: 梁燕;季芝娟;曾宇翔
• 申請（專利權）人: 中國水稻研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;A01H1/02;A01H1/04
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1.一種利用分子標記輔助選育中等粒重類型水稻的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將水稻品種Lemont與水稻品種揚稻4號雜交并構建分離群體Fn(n≥2)；

(2)用4個分子標記D140A、D456、D746、D1048分別PCR擴增步驟(1)獲得的分離群體內的不同單株的葉片DNA；

(3)利用步驟(2)所述的4個分子標記分別檢測步驟(1)描述的分離群體內的不同單株，追蹤4個與水稻粒重有關的數量性狀基因座位(QTL)；其中標記D140A定位于水稻第1染色體，用于追蹤水稻第1染色體上與粒重有關的QTL：qGW-1YD；標記D456定位于水稻第4染色體，用于追蹤水稻第4染色體上與粒重有關的QTL：qGW-4LE；標記D746定位于水稻第7染色體，用于追蹤水稻第7染色體上與粒重有關的QTL：qGW-7LE；標記D1048定位于水稻第10染色體，用于追蹤水稻第10染色體上與粒重有關的QTL：qGW-10LE；將標記D140A擴增出的與揚稻4號帶型相同的分子標記基因型命名為A，將標記D456擴增出的與Lemont帶型相同的分子標記基因型命名為B，將標記D746擴增出的與Lemont帶型相同的分子標記基因型命名為C，將標記D1048擴增出的與Lemont帶型相同的分子標記基因型命名為D；

(4)選擇步驟(1)描述的分離群體內聚合步驟(3)描述的A、B、C、D全部4個基因型的單株以獲得平均千粒重最小的水稻材料；選擇步驟(1)描述的分離群體內聚合步驟(3)描述的A、B、C、D四個基因型中的任意3個基因型的單株以獲得平均千粒重比聚合A、B、C、D全部4個基因型的單株更大的水稻材料；選擇步驟(1)描述的分離群體內聚合步驟(3)描述的A、B、C、D四個基因型中的任意2個基因型的單株以獲得平均千粒重較聚合A、B、C、D四個基因型中的任意3個基因型的單株更大的水稻材料；選擇步驟(1)描述的分離群體內攜帶步驟(3)描述的A、B、C、D四個基因型中的任意1個基因型的單株以獲得平均千粒重較聚合A、B、C、D四個基因型中的任意2個基因型的單株更大的水稻材料；

(5)將聚合步驟(4)描述的不同數目的基因型的單株自交多代，以獲得不同千粒重的水稻純合材料。

2.根據權利要求1所述的利用分子標記輔助選育中等粒重類型水稻的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，將Lemont與揚稻4號進行雜交，可選擇Lemont作為母本揚稻4號作為父本，也可以選擇揚稻4號作為母本Lemont作為父本進行雜交。

3.根據權利要求1所述的利用分子標記輔助選育中等粒重類型水稻的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，利用4個分子標記D140A、D456、D746、D1048來PCR擴增步驟(1)描述的分離群體內的單株的數目，應根據育種實際需要確定；以F2群體為例，要想在步驟(4)篩選獲得1株攜帶A、B、C、D全部4個基因型的單株，理論上應檢測不少于256個單株(計算方法為4×4×4×4＝256)，又例如，要想在步驟(4)篩選獲得1株攜帶A、B、C、D四個基因型中的3個基因型的單株，理論上應檢測不少于64個單株(計算方法為4×4×4＝64)；以上例子只是理論上的推測，在實際檢測過程中，應該根據實際需要確定檢測的單株數目；總的來說，檢測的單株數目越多，則獲得步驟(4)描述的不同要求的單株的機會才越大。

4.根據權利要求1所述的利用分子標記輔助選育中等粒重類型水稻的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，分子標記基因型A的帶型與利用標記D140A在揚稻4號上PCR擴增再通過8％濃度的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測到的帶型相同，但A并不是qGW-1YD的基因型，由于D140A與qGW-1YD基因連鎖，可間接通過選擇A的基因型來選擇qGW-1YD的基因型；同理可根據D456與qGW-4LE連鎖而通過間接選擇B基因型來選擇qGW-4LE的基因型；根據D746與qGW-7LE連鎖而通過間接選擇C基因型來選擇qGW-7LE的基因型；根據D1048與qGW-10LE連鎖而通過間接選擇D基因型來選擇qGW-10LE的基因型。