[發明專利]一種提高牛犢免疫力的微生態制劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201611055798.5
• 申請日: 2016-11-25
• 公開（公告）號: CN106578450A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 譚春萍;張艷雯;黃廣君;黃福標;蒙超
• 申請（專利權）人: 南寧學院
• 主分類號: A23K50/10
• 分類號: A23K50/10;A23K10/18;A23K40/00;C12N1/20;C12N1/16;C12R1/07;C12R1/10;C12R1/125;C12R1/865
• 代理公司: 貴陽派騰陽光知識產權代理事務所(普通合伙)52110
• 代理人: 管寶偉

技術領域

本發明涉及微生態制劑技術領域，尤其是一種提高牛犢免疫力的微生態制劑及制備方法和應用。

背景技術

牛犢體重小，體質差，免疫系統有待發育，抵抗力低下，很多微小的不利因素都會導致發病。當前，在牛犢防病抗病方面，大多采用的是抗生素作為飼料添加劑或者直接注射，以達到增強牛犢免疫力，降低牛犢的發病率。但是，隨著致病微生物的不斷變異，抗生素存在的局限性和所帶來的危害逐漸被裸露出來，如：大量的抗生素的使用，不僅使得牛犢在生長過程中的抗藥性增強，抵抗力逐漸低下，而且還使得在牛肉以及牛肉制品中的殘留量較高，對人類的健康造成了威脅。據報道，在歐洲大部分國家已經開始在人體以及與人類食物鏈直接相關聯的動物體中，禁用了抗生素，如英國。

隨著抗生素缺陷的逐步突出，對于研究一種能夠替代抗生素功效的產品已經成為了急需解決的技術問題。據研究發現，有益微生物制劑的代謝物極具活性，能夠調節動物體機能、促使動物機體產生抗體，提高動物免疫力，與此同時，很多有益微生物本身就具有抑菌作用，在進入動物體中后，對致病微生物的生長具有抑制作用。

現有技術中出現了大量的采用微生物制劑作為添加劑添加在動物飼料中，以便實現增強動物體的抗病性，提高免疫力的目的，如專利申請號為201310465699.4的一種治療奶牛隱性乳房炎的中藥微生態制劑，其采用益生菌與中藥組合物等進行配合制備微生態制劑，使得其能夠提高奶牛免疫力，實現對奶牛隱形乳房炎的治療；再如專利申請號為201610343971.5的動物用微生態制劑及其應用，其活性成分是用發酵培養基培養復合菌劑得到的培養物；所述復合菌劑的活性成分由枯草芽胞桿菌和黑曲霉組成，以達到促進育肥豬的生長性能，顯著提高豬的總增重和日增重，顯著降低料肉比，節約飼料成本；除此之外，也能夠提高雞生長性能、雞抗氧化性能和雞免疫性能。

盡管如此，現有技術中對于微生態制劑在動物飼料中作為添加劑，或者在動物體免疫力改善方面的應用，有著大量的研究，但是，對于微生態制劑的不斷探索，依然是本領域技術人員不斷努力的方向，而且現有技術中，針對牛犢免疫力增強的微生態制劑的研究還相對較少。

發明內容

為實現以上目的，本發明的技術方案是提供一種提高牛犢免疫力的微生態制劑，由納豆芽孢桿菌液、地衣芽孢桿菌液、植物乳桿菌液、啤酒酵母菌液制成，其菌液體積比為：0.8-1.5：1-1.5：0.6-1.4：0.6-1.3。

優選，所述微生態制劑含有載體，所述載體為土豆粉、大豆粉中的一種或幾種。

優選，所述混合菌液中，納豆芽胞桿菌菌液、地衣芽孢桿菌菌液、植物乳桿菌菌液、啤酒酵母菌菌液的體積比為1：1.2：1：0.8。

優選，所述混合菌液與載體的體積重量比為1：1.5。

一種提高牛犢免疫力的微生態制劑的制備方法，采用本身沒有致病性，能產生多種抗菌素和酶、具有廣譜抗菌活性和極強的抗逆能力的納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌、啤酒酵母菌進行優選擴大培養，生產工藝采用分離培養，添加適于菌體生長保存的載體，其制備方法為：

第一步，良種菌株篩選培養：

在哺乳期牛的瘤胃中取食糜為菌源，采用MRS乳酸菌培養基進行乳酸菌分離，篩選出植物乳桿菌和地衣芽孢桿菌；在啤酒發酵液中用酵母選擇培養基分離啤酒酵母菌；在大豆發酵中利用營養瓊脂培養基分離納豆桿菌將分離的菌種進行劃線培養，選出生長快、菌體特征明顯的納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、植物乳桿菌、啤酒酵母菌；

第二步，良種菌株擴大培養：

將步驟1中生長快的納豆芽孢桿菌接入裝有40ml種子培養基的100ml錐形瓶，33℃、185r/min培養24小時；取2％(v/v)種子液加入裝有40ml發酵培養基的100ml錐形瓶中，38℃、185r/min培養24小時，所述的發酵培養基成分為葡萄糖1％，麥芽糖1％，大豆蛋白胨8％，胰蛋白胨4％，K2HPO40.1％,KH2PO40.6％,CaCl20.02％,MgSO40.05％，pH調制7；培養后的發酵菌液稀釋，菌液濃度大于10⁹cell/ml,置于4℃保存。

由步驟1中取生長良好的地衣芽孢桿菌菌種，接種入裝有40mlMRS液體培養基的100ml錐形瓶，38℃、185r/min培養24小時；取2％(v/v)種子液加入裝有40ml發酵培養基的100ml錐形瓶中，38℃、培養24小時，制得發酵菌液，稀釋菌液濃度為大于10⁸cell/ml，置于4℃保存。