[發明專利]一種替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法

有效

• 申請號: 201611055702.5
• 申請日: 2016-11-25
• 公開（公告）號: CN106645528B
• 公開（公告）日: 2018-08-31
• 發明（設計）人: 歐世榮;李敏;許娟;馬歡
• 申請（專利權）人: 成都欣捷高新技術開發股份有限公司
• 主分類號: G01N30/74
• 分類號: G01N30/74;G01N30/60;G01N30/06
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 鐘瑩潔;房云

1.一種替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于，采用以硅膠表面鍵合纖維素-三(3,5-二氯苯氨基甲酸酯)為填充劑的手性色譜柱，以低級烷烴-低級醇的混合溶液為流動相A，以二氯甲烷為流動相B，其中，所述流動相A為正己烷-異丙醇-甲醇的混合溶液，正己烷-異丙醇-甲醇的體積比為300～330:17～12:17～12，按照以下梯度進行洗脫：

0分鐘時，流動相A為91～95％且流動相B為9～5％；20分鐘時，流動相A為84～88％且流動相B為16～12％；40分鐘時，流動相A為68～72％且流動相B為32～28％；45分鐘時，流動相A為68～72％且流動相B為32～28％；45.01分鐘時，流動相A為91～95％且流動相B為9～5％；60分鐘時，流動相A為91～95％且流動相B為9～5％。

2.根據權利要求1所述替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于，所述檢測方法具體包括以下步驟：

a)分別稱取替格瑞洛對照品和替格瑞洛手性異構體對照品，利用無水乙醇溶解并稀釋制成每1ml中約含替格瑞洛1mg、各手性異構體2μg的系統適用性溶液；

b)稱取替格瑞洛樣品，利用無水乙醇配制成每1ml中含1mg替格瑞洛的供試品溶液；

c)利用無水乙醇將所述供試品溶液稀釋1000倍作為對照溶液；

d)分別取步驟a)、步驟b)、步驟c)的溶液各10μl，分別注入高效液相色譜儀并進行測定，記錄色譜圖，完成替格瑞洛手性異構體的測定，采用主成份自身對照法對替格瑞洛手性異構體的含量進行計算。

3.根據權利要求1或2所述替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于，流動相的流速為0.8～1.2ml/min，色譜柱柱溫為22～28℃；檢測器為紫外檢測器，檢測波長為250～350nm。

4.根據權利要求1或2所述替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于，所述手性色譜柱為IC、IA和IB手性色譜柱中的一種。

5.根據權利要求1或2所述替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于，替格瑞洛的手性異構體為下列七種結構所示物質：

異構體A的結構為：

異構體B的結構為：

異構體C的結構為：

異構體D的結構為：

異構體E的結構為：

異構體F的結構為：

異構體G的結構為：

6.根據權利要求1或2所述替格瑞洛手性異構體含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于，流動相的流速為1ml/min，檢測波長為300nm，手性色譜柱為IC，色譜柱柱溫為25℃。