[發明專利]具有改進的可產生性的變體免疫球蛋白

在審

• 申請號: 201611055580.X
• 申請日: 2010-08-20
• 公開（公告）號: CN106986935A
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發明（設計）人: 安德里亞·阿尼爾;宙斯·西門尼斯;麗貝卡·邁克爾;伊維特·斯特爾伍德;杰西·澤杜
• 申請（專利權）人: 英國龍沙生物醫藥股份有限公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00;A61K39/395
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司11204
• 代理人: 王達佐,洪欣

1.改進免疫球蛋白的可產生性的方法，包括：

鑒定具有VL結構域和VH結構域的母體免疫球蛋白，

其中所述母體免疫球蛋白是完整的人或人源化抗體或者人或人源化Fab抗體片段，

在所述母體免疫球蛋白的VL結構域中引入L37Q和Q45R取代、或者L46R取代；或者

在所述母體免疫球蛋白的VH結構域中引入選自E1Q、Q1D、G17R、R95D、G96A、S102V、P102Y、P102V、S100dM或W103V的取代；或者

在所述母體免疫球蛋白的VH結構域中引入Q1A和P102Y取代；Q1E和P102Y取代；R95D和S102V取代；H94R、R95D和S102V取代；H94R、R95D、V100F和S102V取代；S100dF和P102V取代；S100dF和P102Y取代；S100dM和P102Y取代；S100dM和P102V取代；或者

在所述母體免疫球蛋白的VL結構域中引入L37Q和Q45R取代，并且在所述母體免疫球蛋白的VH結構域中引入R95D或S102V取代，或者

在所述母體免疫球蛋白的VL結構域中引入L37Q和Q45R取代，并且在所述母體免疫球蛋白的VH結構域中引入R95D和S102V取代，

所述母體免疫球蛋白的VH結構域和VL結構域中的所述位置根據Kabat編碼方案進行編碼，以及

測試所述免疫球蛋白結合母體免疫球蛋白的靶抗原的能力，

從而產生具有VL結構域和VH結構域的變體免疫球蛋白，所述變體免疫球蛋白由具有所引入取代的母體免疫球蛋白的VL結構域和VH結構域組成，相對于所述母體免疫球蛋白，所述變體免疫球蛋白在表達時表現出降低的聚集傾向和增加的產生能力。

2.如權利要求1所述的方法，其中相對于所述母體免疫球蛋白，所述變體免疫球蛋白表現出產生能力增加至少20％和聚集傾向降低至少30％。

3.如權利要求1或2所述的方法，其中相對于所述母體免疫球蛋白序列，所述變體免疫球蛋白的序列具有如權利要求1所述的至多10處氨基酸取代。

4.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VH結構域引入P102Y取代以及Q1A或Q1E取代。

5.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VH結構域引入S102V取代和R95D取代。

6.如權利要求5所述的方法，其中在所述VH結構域引入H94R取代和V100F取代。

7.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VL結構域引入L37Q取代和Q45R取代。

8.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VH結構域引入S102V取代和R95D取代，并且在所述VL結構域引入L37Q取代和Q45R取代。

9.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VL結構域引入L37Q取代和Q45R取代，并且在所述VH結構域引入S102V取代。

10.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VL結構域引入L37Q取代和Q45R取代，并且在所述VH結構域引入R95D取代。

11.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VH結構域引入S100dF取代以及P102V或P102Y取代。

12.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VH結構域引入S100dM取代以及P102V或P102Y取代。

13.如權利要求1或2所述的方法，其中在所述VH結構域引入H94R和R95D取代，并且在所述VL結構域引入L46R取代。

14.如權利要求1或2所述的方法，其中所述變體免疫球蛋白在重組系統中表達。

15.如權利要求1或2所述的方法，其中所述變體免疫球蛋白在表達后進行分離和/或純化。

16.如權利要求1或2所述的方法，其中將所述變體免疫球蛋白與藥學上可接受的賦形劑一起配制。