[發(fā)明專利]一種多芳基取代咪唑熒光探針及其制備方法和在特異性檢測G-四鏈體中的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611054082.3 | 申請日： | 2016-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN106749208B | 公開（公告）日： | 2019-10-01 |
| 發(fā)明（設計）人： | 黃志紓;譚嘉恒;胡命豪;陳碩斌 | 申請（專利權）人： | 中山大學 |
| 主分類號： | C07D405/14 | 分類號： | C07D405/14;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 陳衛(wèi) |
| 地址： | 510275 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 四鏈體 特異性檢測 核酸二級結構 多芳基取代 熒光探針 式( I ) 野生型 咪唑 制備 熒光分光光度計 二級結構 技術操作 結構穩(wěn)定 快速檢測 設備要求 探針制備 熒光響應 靈敏性 專一性 可用 探針 突變 應用 檢測 | ||
1.一種多芳基取代咪唑熒光探針，其特征在于，所述多芳基取代咪唑熒光探針的結構式如式(I)為：
式中，n＝1，2，3，4，5；R1為N-甲基哌嗪；R2為N-甲基哌嗪。
2.一種根據(jù)權利要求1所述的多芳基取代咪唑熒光探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1.將直接與N-甲基哌嗪反應，再與炔基取代的苯甲醛發(fā)生縮合反應得到
S2.將熒光素用濃硫酸酯化得然后通過取代反應引入二溴烷烴側鏈得到化合物疊氮化后制得化合物
S3.將S1中與S2中進行點擊反應，得到所述多芳基取代咪唑熒光探針。
3.權利要求1所述的多芳基取代咪唑熒光探針在制備檢測G-四鏈體的試劑中的應用。
4.根據(jù)權利要求3所述的應用，其特征在于，所述多芳基取代咪唑熒光探針用于特異性檢測野生型c-MYC G-四鏈體結構。
5.根據(jù)權利要求4所述的應用，其特征在于，通過如下方法檢測野生型c-MYC G-四鏈體結構：
S1.將待測DNA溶于pH值為7.2～7.4的緩沖液，得到溶液A；將所述多芳基取代咪唑探針溶解，再用pH值為7.2～7.4的緩沖液稀釋，得到溶液B；
S2.將S1中的溶液A和溶液B混合，得到混合液，所述混合液中待測DNA與多芳基取代咪唑探針的摩爾比為10:1，混合后對混合液進行熒光光譜分析。
6.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，S2中判斷待測DNA為野生型c-MYC G-四鏈體結構的方法如下：
當在紫外燈下進行肉眼觀察時，與溶液B對比，若混合液在紫外燈下通過肉眼觀察到熒光增強，則待測DNA為野生型c-MYC G-四鏈體結構；
或當對混合液進行熒光光譜分析時，與溶液B相比，若混合液的熒光發(fā)射強度增強，則待測DNA為野生型c-MYC G-四鏈體結構。
7.根據(jù)權利要求6所述的應用，其特征在于，當對混合液進行熒光光譜分析時，與溶液B相比，若混合液的熒光發(fā)射強度增強5～20倍，則待測DNA為野生型c-MYC G-四鏈體結構。
8.根據(jù)權利要求5中所述的應用，其特征在于，所述緩沖液為Tris-鹽酸緩沖液，所述多芳基取代咪唑用二甲基亞砜溶解。
9.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，S2中溶液A和溶液B的混合反應時間為1分鐘。
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