[發(fā)明專利]一種同時生產(chǎn)木耳多糖和黑色素的方法

有效

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• 申請日: 2016-11-25
• 公開（公告）號: CN106916861B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設計）人: 楊海龍;周化斌;楊歡東
• 申請（專利權）人: 溫州大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12P1/02;C12R1/645
• 代理公司: 北京國翰知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 李笑磊

本發(fā)明提供一種同時生產(chǎn)木耳多糖和黑色素的方法，具體步驟為：1）菌種活化；2）搖瓶種子培養(yǎng)；3）發(fā)酵培養(yǎng)；4）分離純化木耳黑色素；5）分離純化木耳多糖。本發(fā)明的有益效果為：黑木耳菌可同時產(chǎn)生木耳黑色素和木耳多糖，直接從發(fā)酵液中提取黑色素和木耳多糖；發(fā)酵培養(yǎng)基能誘導黑木耳菌分泌黑色素和木耳多糖，使其分泌黑色素和木耳多糖的量增加，其他對本產(chǎn)品優(yōu)良品質無關的物質分泌量減少，提高了產(chǎn)品發(fā)酵效率，縮短了產(chǎn)品制備時間；分離純化得到的產(chǎn)品純度高，結構不會被破壞，活性強，提取率高。

技術領域

本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領域，具體涉及一種同時生產(chǎn)木耳多糖和黑色素的方法。

背景技術

黑木耳（Auricularia auricula）又名細木耳、川耳、云耳，別名黑菜、木蛾、樹雞、木菌、耳子、光木耳、榆耳、桑耳等，因其側生于樹木上，形似人耳而得名。是我國傳統(tǒng)的藥食兩用真菌，營養(yǎng)豐富，具有益氣強身、補氣血、潤肺、止血、止痛、通便等功效，是我國一種重要的中藥資源。

研究表明木耳菌中的主要活性成分為黑色素、木耳多糖、氨基酸、微量元素等。黑色素具有抗氧化、清除自由基、刺激免疫、誘導腫瘤壞死因子TNF-a 和白介素IL-6 的合成、保護肝臟、防紫外線輻射等生物活性。木耳多糖具有提高免疫、降血脂、抗血栓、抗衰老、降血糖、抗凝血、抗氧化、抗輻射以及止血等活性。

近幾年，以木耳菌為出發(fā)菌，發(fā)酵法生產(chǎn)木耳菌絲體、多糖和黑色素已有研究報導，現(xiàn)有技術如授權公告號為CN102766658B的中國發(fā)明專利，公開了一種發(fā)酵法制備黑木耳黑色素的生產(chǎn)工藝，其特征是以麥麩汁為主要成分，添加干酪素、硫酸銅、磷酸二氫鉀等組成發(fā)酵培養(yǎng)基，接種黑木耳(Auricularia auricula) 菌絲體，經(jīng)液體深層發(fā)酵，分離純化和冷凍干燥制得純度高、食用安全的黑木耳黑色素。本發(fā)明制備黑木耳黑色素具有生產(chǎn)周期短、成本低、產(chǎn)量高和便于后續(xù)加工等特點，黑木耳黑色素產(chǎn)品呈粉末狀，純度達70~85％，產(chǎn)量為900~1100mg/L。現(xiàn)有技術如授權公告號為CN103641924B的中國發(fā)明專利，公開了一種從木耳中提取木耳多糖的方法，其是選取干木耳為原料，經(jīng)浸泡、清洗、搗碎后加入纖維素酶，控制酶解條件酶解破除細胞壁；酶解后的木耳渣采取熱水浸提；木耳酶解液與木耳浸提液合并后經(jīng)過濾，再加入鞣酸溶液去除過濾液中的蛋白，離心收集的多糖溶液采用乙醇溶液醇沉；最后經(jīng)真空干燥而成多糖產(chǎn)品。本發(fā)明的提取方法工藝合理，操作簡單，成分保留全面，多糖得率及純熟高，產(chǎn)品安全性好。

現(xiàn)有的研究都只涉及發(fā)酵法單獨生產(chǎn)木耳多糖或黑色素，由于木耳多糖和黑色素分別為初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物，兩者發(fā)酵生產(chǎn)的菌株、發(fā)酵條件不一，需要篩選能同時高產(chǎn)木耳多糖和黑色素的菌株，并綜合考察同時優(yōu)化木耳多糖和黑色素的生產(chǎn)條件。木耳多糖和黑色素都是具有良好應用前景的生物活性物質，以液體發(fā)酵法同時生產(chǎn)木耳多糖和黑色素可同時獲得這兩種物質，但目前尚無有關以液體發(fā)酵法同時生產(chǎn)木耳多糖和黑色素的研究報導。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種同時提取黑色素和木耳多糖，且二者量高、純度高的一種同時生產(chǎn)黑色素和木耳多糖的方法。

本發(fā)明針對背景技術提到的問題，采取的技術方案為：以黑木耳菌為出發(fā)菌株，經(jīng)斜面菌種活化，進行液體搖瓶培養(yǎng)及發(fā)酵培養(yǎng)獲得木耳菌發(fā)酵液，從所得發(fā)酵液中經(jīng)分離純化后分別獲得木耳多糖和黑色素。

具體地，本發(fā)明以液體發(fā)酵法同時生產(chǎn)木耳多糖和黑色素的工藝中，所采用的菌種黑木耳菌（Auriculariaauricula）于2014年9月29日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏編號CGMCCNo.9711。

具體操作步驟為：