[發明專利]一種戊糖乳桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201611051325.8
• 申請日: 2016-11-24
• 公開（公告）號: CN106591176B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 金雪霞;路慶鵬
• 申請（專利權）人: 江蘇綠科生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K30/18;C12R1/225
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 黃天天

本發明公開了一種戊糖乳桿菌，所述戊糖乳桿菌于2016年8月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC NO.12837。所述戊糖乳桿菌的耐酸范圍為2.0?4.5。本發明進一步提出了所述的戊糖乳桿菌的應用及其耐酸性研究。

技術領域

本發明屬于微生物領域，具體是一種新發現的戊糖乳桿菌及其應用。

背景技術

反芻動物飼養業中，粗飼料資源的缺乏以及品質低下，是影響產業發展的重要因素。青貯調制作為一種簡單易行的技術，具有提高適口性、消化率和降低成本等特點，秸稈青貯技術已被廣泛地研究和應用，越來越多的添加劑被應用于青貯飼料中，其中，乳酸菌是應用最多的一種發酵促進劑。乳酸菌在青貯發酵中有著極其重要的作用，直接影響著青貯飼料的質量。

發明內容

本發明發現了一種新的戊糖乳桿菌及其用途。

具體地，本發明在玉米秸稈青貯飼料中提取分離得到一株產酸能力強且穩定的菌株，經鑒定為一種新的戊糖乳桿菌，其于2016年8月15日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏號為CGMCC NO：12837。

本發明的戊糖乳桿菌16S rDNA序列SEQ NO 1所示。

MRS培養基，培養基配方為：葡萄糖30g，蛋白胨10g，酵母粉7.5g，無水乙酸鈉5g，K₂HPO₄2g，硫酸鎂0.8g，硫酸錳0.2g，檸檬酸二銨2g，PH7.0-7.5，培養溫度為37℃。

菌種的形態：

所述戊糖乳桿菌在培養基上培養36h，生成的的菌落圖如圖1所示，菌落邊緣整齊，黃色透明，表面光滑；將單菌落取樣在電子顯微鏡下(放大倍數為1800倍)進行觀察，觀察結果如圖2所示，細胞形態為桿狀，革蘭氏染色鑒定為革蘭氏陽性，無芽孢和鞭毛。

本發明進一步發現了該戊糖乳桿菌對pH的耐受性。

本發明的植物乳桿菌16SrDNA序列如序列表所示。通過對該菌株的16SrDNA進行PCR擴增，回收擴增產物測序，序列與GenBank數據庫中已經登錄的序列進行同源性比較，該菌株的16SrDNA序列與戊糖乳桿菌同源性達99％。

本發明新發現的戊糖乳桿菌是從玉米秸稈青貯飼料中分離得到的，最適生長溫度為32～37℃，菌種為直或彎的桿狀或成鏈狀，最適pH 6.5左右，屬于同型發酵乳酸菌。相比其他乳酸菌，此菌抗逆性強，產酸量高，在MRS液體培養基中，戊糖乳桿菌產酸能力最強，戊糖乳桿菌在發酵8h后pH值可以達到4.1，在12h發酵后pH值能降低到2.5，從而可以將植物表面的可溶性碳水化合物轉化為乳酸、乙酸等有機酸，導致飼料pH值降低，來抑制腐敗微生物菌群的生產繁殖，從而達到保持作物營業特性的目的，青貯飼料中腐敗菌很多，主要分解青貯飼料中的蛋白質和氨基酸，尤其以芽孢桿菌和大腸桿菌為主，其中芽孢桿菌屬于細菌，對青貯飼料的好氣性變質起重要作用，但是加入此戊糖乳桿菌進行青貯發酵，戊糖乳桿菌產生大量的乳酸，并且在青貯過程中能快速使pH下降從而起到很有效的防腐、抑制致病菌生長繁殖的功效，大大改善玉米秸稈青貯飼料氣味酸香、柔軟多汁、顏色黃綠、適口性好等優點。

附圖說明

圖1為戊糖乳桿菌菌落圖；

圖2為戊糖乳桿菌鏡檢圖。

具體實施方式

以下是通過具體實驗詳細說明了戊糖乳桿菌的篩選及其耐酸性的研究。