[發(fā)明專利]一種新鮮毛竹筍中提取蛋白的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611047728.5
• 申請日: 2016-11-22
• 公開（公告）號: CN106720913B
• 公開（公告）日: 2020-01-10
• 發(fā)明（設計）人: 吳良如;楊慧敏;楊金來;鐘浩;潘雁紅;葉曉丹
• 申請（專利權）人: 國家林業(yè)局竹子研究開發(fā)中心
• 主分類號: A23J1/00
• 分類號: A23J1/00;A23J3/14;A23J3/24;A23L33/21;A23L33/185
• 代理公司: 32273 南京蘇創(chuàng)專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 沈振濤

1.一種新鮮毛竹筍中提取蛋白的方法，其特征在于：以新鮮毛竹筍為原料，依次經(jīng)過五步低溫提取方法，分別得到第一蛋白、第二蛋白、第三蛋白、第四蛋白和第五蛋白；第一蛋白、第二蛋白、第三蛋白、第四蛋白和第五蛋白中含有相同的19種氨基酸，19種氨基酸分別為天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸、γ-氨基正丁酸和鳥氨酸；五步低溫提取方法包括順序相接的如下步驟：

1)將采摘的新鮮毛竹筍經(jīng)去皮、洗滌、切片，得筍片；

2)將步驟1)所得筍片與去離子水混勻，然后通過勻漿機充分粉碎5～10min，得到勻漿液，其中，去離子水的質(zhì)量用量為筍片質(zhì)量的2-8倍；

3)將步驟2)所得勻漿液放入膠體磨中粉碎至最大顆粒尺寸小于500μm；

4)將步驟3)所得粉碎漿液的溫度調(diào)整為15℃以下，然后進行高壓均質(zhì)水提，均質(zhì)時間為5～30min，然后依次經(jīng)離心、水洗殘留、離心、合并上清液得到上清液A和殘留a；

5)將步驟4)所得上清液A進行40℃以下低溫減壓蒸餾濃縮，再經(jīng)透析或超濾除鹽和有機小分子，冷凍干燥得到第一蛋白；

6)將NaCl溶液加入到步驟4)所得的殘留a中，在5～15℃下攪拌混合均勻，倒入均質(zhì)機中，進行高壓均質(zhì)鹽提，提取時間為5～30min，依次經(jīng)離心、水洗殘留、離心、合并上清液得到上清液B和殘留b，其中，NaCl溶液的用量為2-8mL/g筍片；

7)將步驟6)所得上清液B，在40℃以下低溫下進行減壓蒸餾濃縮，再經(jīng)透析或超濾除鹽和有機小分子，用冷凍干燥法干燥，得到第二蛋白；

8)將步驟6)所得的殘留b與無水乙醇混合，并在5～15℃下攪拌混合均勻，然后在高壓均質(zhì)機中進行高壓均質(zhì)醇提5～30min，依次經(jīng)離心、水洗殘留、離心、合并上清液得到上清液C和殘留c，其中，無水乙醇的用量為2-8mL/g筍片；

9)將步驟8)所得的上清液C，在低于40℃的低溫下，采用減壓蒸餾除溶劑得到濃縮液，經(jīng)透析或超濾除鹽和有機小分子，用冷凍干燥法干燥，得到第三蛋白；

10)在5～15℃下，用NaOH溶液調(diào)節(jié)步驟8)所得的殘留c的pH為9.0～10.0，然后在高壓均質(zhì)機中進行高壓均質(zhì)堿提5～30min，再依次經(jīng)離心、水洗殘留、離心、合并上清液得到上清液D和殘留d，其中，溶液的用量為2-8mL/g筍片；

11)將步驟10)所得上清液D用HCl溶液調(diào)成中性，在40℃以下低溫下進行減壓蒸餾濃縮，再經(jīng)透析或超濾除鹽和有機小分子，用冷凍干燥法干燥，得到第四蛋白；

12)在5～15℃下，用NaOH溶液調(diào)節(jié)步驟10)所得的殘留d的pH為10.0～11.0，然后在高壓均質(zhì)機中進行高壓均質(zhì)堿提5～30min，再依次經(jīng)離心、水洗殘留、離心、合并上清液得到上清液F和殘留f，其中，溶液的用量為2-8mL/g筍片；

13)將步驟12)所得上清液F用HCl溶液調(diào)成中性，在40℃以下低溫下進行減壓蒸餾濃縮，再經(jīng)透析或超濾除鹽和有機小分子，用冷凍干燥法干燥，得到第五蛋白。

2.如權利要求1所述的新鮮毛竹筍中提取蛋白的方法，其特征在于：第一蛋白、第二蛋白、第三蛋白、第四蛋白和第五蛋白中19種氨基酸的質(zhì)量含量分別為50-70％、8-14％、5-12％、8-15％、2-6％。

3.如權利要求1或2所述的新鮮毛竹筍中提取蛋白的方法，其特征在于：19種氨基酸中，其中8種為人體必需氨基酸，分別為蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸和組氨酸；第一蛋白、第二蛋白、第三蛋白、第四蛋白和第五蛋白中8種人體必需氨基酸的質(zhì)量含量分別為20-35％、2-6％、1-4％、2-5％、0.1-0.6％。

4.如權利要求1或2所述的新鮮毛竹筍中提取蛋白的方法，其特征在于：還包括步驟14)將步驟12)所得的殘留f，經(jīng)過水洗、干燥，制備為超細竹筍膳食纖維粉。

5.如權利要求1或2所述的新鮮毛竹筍中提取蛋白的方法，其特征在于：步驟10)和步驟12)中調(diào)節(jié)pH所用NaOH溶液的濃度為0.1～1.0mol/L；步驟11)和步驟13)中調(diào)節(jié)pH所用HCl溶液的濃度為0.1～1.0mol/L。