[發(fā)明專(zhuān)利]三羥基咪唑-熒光素pH熒光探針及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611047563.1
• 申請(qǐng)日: 2016-11-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106749307B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙冰;宋波;李少鑫;孔鳳巧;劉婷;闞偉;王麗艷
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 齊齊哈爾大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07D493/10
• 分類(lèi)號(hào): C07D493/10;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 23210
• 代理人: 王艷萍

1.一種用于pH檢測(cè)的三羥基咪唑-熒光素pH熒光探針，其特征在于該探針的結(jié)構(gòu)式為：

2.制備權(quán)利要求1所述的一種用于pH檢測(cè)的三羥基咪唑-熒光素pH熒光探針的方法，其特征在于該方法如下：

一、將菲醌、5-硝基水楊醛、苯胺、乙酸銨按照1：(1.0～2.0)：(1.0～2.0)：(2～5)物質(zhì)的量比加入到反應(yīng)器中，再加入20.0～40.0ml冰乙酸，升溫至80～130℃并攪拌4～12h后，冷卻至室溫，向反應(yīng)器中加入水，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30～40％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8～10，抽濾，收集黃色固體，干燥；乙酸乙酯重結(jié)晶，經(jīng)抽濾、干燥，得到土黃色固體，即中間體化合物I，該中間體化合物I的結(jié)構(gòu)式為

二、稱取2.0mmol中間體化合物I和0.08～0.22g雷尼鎳加入到反應(yīng)器中，再加入乙醇作為溶劑，通入氮?dú)獗Ｗo(hù)，在25～30℃下攪拌，滴加5.0～12.0mL質(zhì)量百分濃度為80％的水合肼溶液，滴加完畢后，升溫至50～80℃，反應(yīng)5～10h，冷卻至室溫，抽濾，并用大量乙酸乙酯洗滌，收集濾液，濃縮，得到棕色固體，即中間體化合物II，該中間體化合物II的結(jié)構(gòu)式為

三、將3.0g熒光素加入到反應(yīng)器中，加入3.0～8.0ml甲醇溶液，加入40％～60％的氫氧化鈉溶液，冷至50～60℃，緩慢滴加8.0～16.0ml氯仿，攪拌3～12h，停止反應(yīng)，冷至25～30℃；加入酸性溶液，調(diào)至pH值為4～6，抽濾，收集褐色固體，干燥，柱分離；得到淺黃色固體，即中間體化合物III，該中間體化合物III的結(jié)構(gòu)式為

四、pH熒光探針的合成：

按照1:1～3物質(zhì)的量比稱取中間體化合物II和中間體化合物III，加入到反應(yīng)器中，再加入酸性介質(zhì)為溶劑，25～30℃下攪拌反應(yīng)4～8h，停止反應(yīng)，加水淬滅，再用堿性溶液調(diào)pH值至6～10，抽濾，水洗濾餅至中性，干燥，乙酸乙酯重結(jié)晶，得到褐色固體，三羥基咪唑-熒光素的pH熒光探針。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的三羥基咪唑-熒光素的pH熒光探針的制備方法，其特征在于酸性介質(zhì)為20～30mL的40～50％的硫酸溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的三羥基咪唑-熒光素的pH熒光探針的制備方法，其特征在于酸性介質(zhì)為15～55mL的37％的濃鹽酸。