[發明專利]一種篩選活性成分和活性組合物的方法

有效

• 申請號: 201611045159.0
• 申請日: 2016-11-22
• 公開（公告）號: CN106706775B
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 李萍;楊華;鄔思琪;宋慧鵬;趙小艾
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 趙超

1.一種篩選活性成分的方法，其特征是，步驟如下：

（1）將準備好的樣品自動進樣，在一定的洗脫條件下分離待測物，同時補償泵調節洗脫液中的有機相，使之維持在一個恒定的范圍內；調節后的洗脫液流經酶泵，在第一個反應線圈中與酶溶液相互作用；然后混合液經過底物泵，在第二個反應線圈中酶催化底物，于470nm吸收波長下觀察產物是否有倒峰生成，實現活性成分的分離及篩選；

待測物的分離以及洗脫液補償的有機溶劑是甲醇或乙腈；

待測物是表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、楊梅素、丹參素、紫草酸、原兒茶醛、丹酚酸B、丹酚酸D、迷迭香酸中的一種或幾種，或是含有這些成分的中藥提取物或中藥復方提取物；

參與反應的酶是以過氧化氫為底物，以愈創木酚為顯色劑，含有血紅素的過氧化物酶家族中的一員，來源是動物、植物或微生物；

（2）利用質譜技術對活性成分進行結構鑒定；

（3）圍繞活性成分自由組合，利用在線裝置探究其作用關系。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，補償泵的流速是0.2~0.5mL/min。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，第二個反應線圈的長度是40~120cm，內徑是0.5~0.8mm。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，酶的濃度是0.5~2.5U/mL。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，底物過氧化氫和顯色劑愈創木酚的濃度是0.5~25mM。