[發(fā)明專利]印度南瓜強(qiáng)雌性狀分子標(biāo)記與鑒定印度南瓜強(qiáng)雌性狀的引物對(duì)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611045056.4
• 申請(qǐng)日: 2016-11-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108085404B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張國(guó)裕;李海真;張帆;田佳星;賈長(zhǎng)才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京市農(nóng)林科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;白艷

1.印度南瓜強(qiáng)雌性狀分子標(biāo)記，為以印度南瓜的基因組DNA為模板，采用引物對(duì)A1進(jìn)行擴(kuò)增得到的DNA分子；所述A1由名稱為P1和P2的單鏈DNA組成，所述P1為與SEQ ID No.3的第204位上游特異結(jié)合的單鏈DNA，所述P2為與SEQ ID No.3的第219位下游特異結(jié)合的單鏈DNA；

所述P1為SEQ ID No.1所示的單鏈DNA；

所述P2為SEQ ID No.2所示的單鏈DNA。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的印度南瓜強(qiáng)雌性狀分子標(biāo)記，其特征在于：所述印度南瓜強(qiáng)雌性狀分子標(biāo)記的多態(tài)性為印度南瓜基因組中對(duì)應(yīng)于SEQ ID No.3第204-219位：存在SEQ IDNo.3第204-219位或缺失SEQ ID No.3第204-219位。

3.鑒定印度南瓜基因型的方法，所述基因型為FF基因型、Ff基因型和ff基因型，所述方法為如下Ⅰ或Ⅱ：

Ⅰ、包括如下K1）和K2）：

K1）以待測(cè)印度南瓜基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1或2中所述A1進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到PCR產(chǎn)物；

K2）檢測(cè)步驟K1）得到的PCR產(chǎn)物，根據(jù)所述PCR產(chǎn)物確定印度南瓜基因型：

如果所述PCR產(chǎn)物對(duì)應(yīng)于SEQ ID No.3為一條含有SEQ ID No.3的第204-219位所示的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為FF基因型；如果所述PCR產(chǎn)物含有一條不含有SEQID No.3的第204-219位所示的DNA片段和一條含有SEQ ID No.3的第204-219位所示的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為Ff基因型；如果所述PCR產(chǎn)物對(duì)應(yīng)于SEQ ID No.3為一條不含有SEQ ID No.3的第204-219位所示的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為ff基因型；

Ⅱ、包括如下L1）和L2）：

L1）以待測(cè)印度南瓜基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1或2中所述A1進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到PCR產(chǎn)物；

L2）下述L21）或L22）：

L21）檢測(cè)步驟L1）得到的PCR產(chǎn)物的大小，根據(jù)所述PCR產(chǎn)物的大小確定印度南瓜基因型：

如果所述PCR產(chǎn)物含有265 bp和249 bp的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為Ff基因型；如果所述PCR產(chǎn)物含有265 bp的DNA片段且不含有249 bp的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為FF基因型；如果所述PCR產(chǎn)物不含有265 bp的DNA片段且含有249 bp的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為ff基因型；

L22）檢測(cè)步驟L1）得到的PCR產(chǎn)物的序列，根據(jù)所述PCR產(chǎn)物確定印度南瓜基因型：

如果所述PCR產(chǎn)物含有SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為Ff基因型；如果所述PCR產(chǎn)物含有SEQ ID No.3所示的DNA片段且不含SEQ IDNo.4所示的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為FF基因型；如果所述PCR產(chǎn)物含有SEQID No.4所示的DNA片段且不含SEQ ID No.3所示的DNA片段，所述待測(cè)印度南瓜的基因型為ff基因型。