[發明專利]一種用于核酸提取純化的氨基化濾紙/膜及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201611039252.0
• 申請日: 2016-11-21
• 公開（公告）號: CN108085314B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 劉鵬;甘五鵬;顧寅
• 申請（專利權）人: 杭州梓晶生物有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;吳愛琴

1.一種制備用于提取純化核酸的氨基化濾紙/膜的方法，為：

a） 首先對濾紙/膜進行表面氧化改性得到表面氧化改性后的濾紙/膜，再用氨基硅烷化試劑與所述表面氧化改性后的濾紙/膜進行硅烷化反應，

從而在所述濾紙/膜的表面修飾上氨基，得到氨基化濾紙/膜； 或

b) 首先對濾紙/膜進行表面氧化改性得到表面氧化改性后的濾紙/膜，再將所述表面氧化改性后的濾紙/膜浸入富含氨基的長鏈化合物的溶液中吸附，

從而在所述濾紙/膜的表面修飾上氨基，得到氨基化濾紙/膜；或

c）將濾紙/膜的表面直接進行環氧基團化得到表面環氧基團化的濾紙/膜， 或，首先對濾紙/膜進行表面氧化改性得到表面氧化改性后的濾紙/膜，然后對所述表面氧化改性后的濾紙/膜的表面進行環氧基團化得到表面環氧基團化的濾紙/膜，

再將其置于富含氨基的長鏈化合物的溶液中，發生接枝反應，從而在所述濾紙/膜的表面修飾上氨基，得到氨基化濾紙/膜。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中，所述表面氧化改性為將濾紙/膜進行臭氧處理或通氧條件下Plasma處理。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中，所述氨基硅烷化試劑選自下述至少一種：3-氨丙基三乙氧基硅烷、3-氨丙基二乙氧基甲基硅烷和3-氨丙基乙氧基二甲基硅烷；

所述硅烷化反應為氨基硅烷化試劑在溶液中反應或氨基硅烷化試劑氣相沉積；

其中，所述氨基硅烷化試劑的溶液中的溶劑為水，或乙醇、異丙醇；

所述氨基硅烷化試劑的溶液中氨基硅烷化試劑的濃度為，以質量百分含量計，0.005%-5%；

所述氨基硅烷化試劑氣相沉積的操作為：燒杯放入到120℃-180℃的烘箱中烘烤至少10 min，然后在燒杯中滴加100 微升氨基硅烷化試劑，立刻放入濾紙/膜，并立即將燒杯用蓋子蓋嚴。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中，所述富含氨基的長鏈化合物為殼聚糖、多聚賴氨酸、多聚組氨酸、聚亞乙基亞胺或聚烯丙基胺；

所述富含氨基的長鏈化合物的溶液為水相，所述富含氨基的長鏈化合物的溶液中富含氨基的長鏈化合物的濃度為，以質量百分含量計，0.001%-0.5%；

所述吸附的溫度為10℃-35℃，時間為0.5 h-30 h。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中，所述環氧基團化的操作為：將濾紙/膜或表面氧化改性后的濾紙/膜置于環氧基硅烷化試劑的溶液中反應，或進行環氧基硅烷化試劑氣相沉積，得到所述表面環氧基團化的濾紙/膜；

所述環氧基硅烷化試劑選自下述至少一種：(3-Glycidyloxypropyl)trimethoxysilane、(3-Glycidoxypropyl)dimethylethoxysilane和(3-Glycidoxypropyl)dimethoxymethylsilane；

所述環氧基硅烷化試劑的溶液的溶劑為水，或乙醇、異丙醇；

所述反應的條件為：反應溫度為10℃-65℃, 反應時間10分鐘-10小時；

所述氣相沉積的操作為：燒杯放入到120℃-180℃的烘箱中烘烤至少10 min，然后在燒杯中滴加100 微升氨基硅烷化試劑，立刻放入濾紙/膜，并立即將燒杯用蓋子蓋嚴；

所述富含氨基的長鏈化合物為殼聚糖、多聚賴氨酸、多聚組氨酸、聚亞乙基亞胺或聚烯丙基胺；

所述富含氨基的長鏈化合物的溶液為水相，所述富含氨基的長鏈化合物的溶液中富含氨基的長鏈化合物的濃度為，以質量百分含量計，0.001%-0.5%。

6.權利要求1-5中任一項所述的方法制備得到的氨基化濾紙/膜。

7.權利要求6所述的氨基化濾紙/膜在提取純化核酸中的應用。

8.包括權利要求6所述的氨基化濾紙/膜的微流控芯片裝置。