[發明專利]一種組合標志物在制備胰腺癌預后判斷試劑盒中的應用及其測定系統和方法

有效

• 申請號: 201611038981.4
• 申請日: 2016-11-24
• 公開（公告）號: CN108107216B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 趙玉沛;李梢;郭俊超;張鵬;周立
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院北京協和醫院;清華大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京金恒聯合知識產權代理事務所 11324
• 代理人: 李強

胰腺癌是具有極差預后的腫瘤，識別其有效的預后標志物具有重要的臨床意義。本發明人提出了一種基于組合標志物來進行胰腺癌患者預后風險評估的方法及其測定系統。其依據病例樣本中組合標志物的表達情況，定量地計算其預后風險指數，并對病例進行高、低風險的分層。本發明涉及五個蛋白(CAPN2，DLV1，FLNA,SHH,GLI1，其中CAPN2，DVL1，FLNA對胰腺癌的預后意義為本發明首次確立)構成的組合標志物、可供檢測標志物表達的免疫組化試劑盒以及預后風險評估和分層的確定系統等。在280例和120例胰腺癌患者中的案例實施結果表明，本發明能有效地預測胰腺癌患者預后風險，尤其對于具有高預后風險的胰腺癌亞群病人具有顯著的預測效果。

技術領域

本發明涉及一種組合標志物、其在制備用于胰腺癌預后患者預后判斷的組合物中的應用及其測定系統和方法。

背景技術

胰腺癌是一種具有極差預后的腫瘤，其死亡率與發生率基本持平。確定有預后價值的因子有著重要的臨床意義。目前，雖然一些常見的臨床病理指數，如淋巴結轉移、神經浸潤、TNM分期以及CA19-9等被認為具有一定的預后價值[1]，但仍然亟需發掘更有效的預后指標來指導胰腺癌的臨床診療。

作為一種復雜疾病，胰腺癌并非由單個基因或其產物決定的，而是腫瘤發生發展過程中的多個病理過程的系統反應，因此將多個病理過程中具有代表性的分子組合起來，即組合標志物，可能能夠更好地刻畫其復雜性。實施上，目前也有文獻報道在一些腫瘤中，由多個分子組成的組合標志物有著比單個分子以及臨床病理指數更好的預后效果[3-5]，有些組合標志物甚至已經納入到臨床指南中[6]。因此，識別有效的組合標志物對于評估胰腺癌的預后風險具有重要的意義。

發明內容

根據本發明的一個方面，提供了檢測一種組合標志物-PD-FLAGS的表達水平的試劑在制備用于胰腺癌預后患者預后判斷的組合物中的應用，其中該組合標志物(簡稱PD-FLAGS)是五個蛋白分子CAPN2、DVL1、FLNA、SHH、GLI1的組合，所述組合標志物PD-FLAGS由Risk score表征：

Risk score＝(-0.023*CAPN2)+(-0.035*DVL1)+(0.052*FLNA)+(-0.043*GLI1)+(0.015*SHH)

上式中，CAPN2、DVL1、FLNA、SHH以及GLI1分別表示各蛋白的定量數值，其中CAPN2、DVL1、FLNA對胰腺癌的預后意義為本發明首次確立。

根據本發明的另一個方面，提供了一種免疫組化檢測試劑盒，用于免疫染色五個蛋白分子CAPN2、DVL1、FLNA、SHH、GLI1，從而獲取其在胰腺癌組織中的表達情況。

根據本發明的另一個方面，提供了一種胰腺癌預后風險測定系統，其特征在于：該系統用來測定一種與胰腺癌預后相關的組合標志物(PD-FLAGS)，該組合標志物是基于五個蛋白分子CAPN2、DVL1、FLNA、SHH、GLI1的表達水平，所述系統包括：

免疫組化檢測試劑盒(20)，用于免疫染色上述五種蛋白分子CAPN2、DVL1、FLNA、SHH、GLI1的表達水平從而獲取其在胰腺癌組織中的表達情況，

組織學積分計算單元(31)，用于確定五種蛋白分子CAPN2、DVL1、FLNA、SHH以及GLI1的在組織中的表達水平，包括：

獲取CAPN2、DVL1、FLNA、SHH、GLI1各自的蛋白染色強度以及陽性細胞比例分數，

得到上述五種蛋白染色強度分別與陽性細胞比例分數的乘積，從而獲得五種蛋白分子各自的表達水平的定量數值，

c)風險指數計算單元(32)，用于根據上述五個蛋白的所述定量數值確定由Riskscore表征的風險指數，其中：