[發明專利]一種檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法

在審

• 申請號: 201611028898.9
• 申請日: 2016-11-18
• 公開（公告）號: CN107037141A
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發明（設計）人: 向平;沈敏;施妍;強火生
• 申請（專利權）人: 司法部司法鑒定科學技術研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海申新律師事務所31272
• 代理人: 黨蕾

1.一種檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)樣品前處理；

(2)GC-MS分析；

其中，步驟(1)所述的樣品前處理將血液或尿液中的硫代硫酸根離子衍生化為五氟芐基雙硫醚，具體操作包括：

取血液樣品或尿液樣品，置于已加入五氟芐基溴的丙酮溶液、L-抗壞血酸水溶液和NaCl水溶液的玻璃試管中，然后在旋渦振蕩器中渦旋0.5～2分鐘，再向其中加入碘的乙酸乙酯溶液、作為內標的1,3,5-三溴苯的乙酸乙酯溶液，接著在旋渦振蕩器中渦旋20～40秒，靜置1～2小時，以2000～4000r/min轉速離心12～20分鐘后，取上清液，進樣至GC-MS系統。

2.根據權利要求1所述的檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，所述水為現配的無氧水，通過將氮氣通入去離子水中15分鐘以上而制得。

3.根據權利要求1所述的檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，所述五氟芐基溴的丙酮溶液的濃度為20μmol/mL，所述L-抗壞血酸水溶液的濃度為200mmol/mL，所述NaCl水溶液的濃度為5wt％，所述碘的乙酸乙酯溶液的濃度為25mmol/mL，所述1,3,5-三溴苯的乙酸乙酯溶液的濃度為0.1μmol/L。

4.根據權利要求3所述的檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，所述樣品前處理的具體操作包括：

取0.2mL血液樣品或尿液樣品，置于已加入0.5mL所述五氟芐基溴的丙酮溶液、0.05mL所述L-抗壞血酸水溶液和0.05mL所述NaCl水溶液的10mL玻璃試管中，然后在所述旋渦振蕩器中渦旋0.9～1.2分鐘，再向其中加入2mL所述碘的乙酸乙酯溶液、0.5mL所述1,3,5-三溴苯的乙酸乙酯溶液，接著在旋渦振蕩器中渦旋24～36秒，靜置1小時，以3000r/min轉速離心12～16分鐘后，取上清液1μL，進樣至GC-MS系統。

5.根據權利要求1所述的檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，步驟(2)所述的GC-MS分析中，氣相色譜條件如下：

HP-5MS毛細管柱，30m×0.25mm×0.25μm；

柱溫升溫程序：起始溫度100℃，保持1.5min后以40℃/min升至280℃，保持1min；

載氣為高純氦氣，恒流1.0mL/min；

汽化室溫度220℃，進樣量1μL，分流比10:1。

6.根據權利要求1所述的檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，步驟(2)所述的GC-MS分析中，質譜條件如下：

電子轟擊離子源(EI)，電子能量70eV；離子源溫度為230℃，四級桿溫度150℃，接口溫度280℃；

五氟芐基雙硫醚的特征碎片離子(m/z)為181、213、426，保留時間為6.0min；作為內標的1,3,5-三溴苯的特征碎片離子(m/z)為235、314，保留時間為4.8min；

定量時采用選擇性離子檢測模式(SIM)，五氟芐基雙硫醚和作為內標的1,3,5-三溴苯的定量碎片離子(m/z)分別為426和314。

7.根據權利要求1～6中任一項所述的檢測血液或尿液中硫代硫酸根離子的方法，其特征在于，用于檢測血液樣品時，LOD為0.05μmol/mL，LOQ為0.1μmol/mL。