[發明專利]凝結芽孢桿菌新菌株及其微生態制劑和飼料

有效

• 申請號: 201611025225.8
• 申請日: 2016-11-22
• 公開（公告）號: CN108085265B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 汪攀;易敢峰;孫自博;朱傳忠;付維來;劉婷;韓科廳;陳麗仙
• 申請（專利權）人: 北京大北農科技集團股份有限公司;福建大北農水產科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;C02F3/34;C12R1/07;C12R1/125;C12R1/225
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• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一株拮抗鏈球菌的凝結芽孢桿菌及其應用，該菌株已保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCC No.12196。將該菌株制成菌粉，可添加到動物飼料中，也可作為拮抗鏈球菌的微生物制劑應用，用含有該菌株的飼料飼喂羅非魚可有效防治鏈球菌病。將該菌和枯草芽孢桿菌、約氏乳桿菌進行混合，制成復合微生態制劑，可以提高羅非魚的生長性能、提高肝臟超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和血清中溶菌酶的活力。另外，該菌發酵液還可以用作養殖環境改良劑，將上述菌的發酵液潑灑到羅非魚養殖池塘，可降低養殖水體中鏈球菌的數量，還可以在低氧條件下清除水體中的亞硝酸鹽。

技術領域

本發明屬于飼料微生態領域，具體涉及一株凝結芽孢桿菌新菌株及其微生態制劑和飼料。

背景技術

中國是世界上最大的羅非魚生產國，產量、出口量和出口額均居世界首位，羅非魚為國內最具國際競爭力的淡水養殖品種，也是最具產業化發展條件的品種，已成為中國南方地區的支柱性產業，在國內有著較強的發展優勢。然而，由無乳鏈球菌、海豚鏈球菌引起的羅非魚病害，在夏、秋季易爆發，該病傳染性強，幼魚與成魚的發病率達10％～30％，死亡率可達25％～80％，甚至更高，給羅非魚養殖業造成了極大的經濟損失，而且還有不斷加劇的趨勢。

目前在羅非魚養殖生產上，人們主要是通過使用抗生素類的化學藥物對鏈球菌引起的病害進行防治，但大量、長期地使用廣譜抗生素、化學藥物和水體消毒劑，對生態環境及公眾健康造成的負面影響受到了人們的關注。近年來，水產疫苗雖然取得了一定的進展，但受疫苗免疫途徑、水體環境、病原變異、魚類自身特點等因素的制約，其在生產上的推廣使用尚需時日。因此，迫切需要尋找一種安全、高效的手段來防治羅非魚鏈球菌病害。

益生菌制劑可以調節腸道微生物區系的平衡、促進腸道的生長發育、增強機體的免疫力進而促進機體生長。且由于其無抗藥性、無殘留、無污染等特性，成為抗生素的良好替代品之一。凝結芽孢桿菌作為益生菌的一種，既具有乳酸菌產酸的特性，又具有芽孢桿菌耐高溫、抗逆性強和耐儲存的優點。歐盟已通過了凝結芽孢桿菌的安全認定，批準其在飼料中應用。《中華人民共和國農業部公告第2045號》批準凝結芽孢桿菌作為飼料添加劑使用。

亞硝酸鹽中毒一直是養殖過程中碰到的另一個比較棘手的問題，往往給養殖戶帶來比較慘重的損失。亞硝酸鹽的生物降解大都需要氧的參與，而目前的高密度養殖導致池塘中氧氣并不充裕，我們需要開發出在低氧條件下就能降解亞硝酸鹽的新產品。

目前，國內尚未有將凝結芽孢桿菌作為鏈球菌拮抗劑的產品，該菌在羅非魚飼料中的應用也未見報道。將該菌做成拮抗鏈球菌的產品，同時在低氧條件下降解亞硝酸鹽，對實現羅非魚健康養殖意義重大。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種凝結芽孢桿菌新菌株及其微生態制劑和應用。

首先，本發明提供一株凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans)新菌株。

該菌株分離自土壤，在MRS平板上呈白色菌落，直徑1～2mm，中級隆起，表面稍干燥，邊緣不整齊，正反面顏色一致，不透明，菌體桿狀，單獨存在，芽孢橢圓。測定該菌株的16S rDNA，與 GenBank公布的凝結芽孢桿菌HM-08的同源性最高(99％)，結合生理生化試驗結果，該菌被鑒定為凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans)，于2016年3月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏編號為：CGMCC No.12196。

本發明還提供凝結芽孢桿菌CGMCC No.12196的發酵方法，包括如下的步驟：

1、平板培養復壯：將凝結芽孢桿菌菌種接種于MRS平板培養基上，于42℃培養12-24h，使菌復壯，并形成單菌落；