[發明專利]一種山牡荊抗腫瘤化合物的研究方法

在審

• 申請號: 201611022732.6
• 申請日: 2016-11-21
• 公開（公告）號: CN106632195A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 代現平;耿楓;劉德勝;侯桂革;趙峰
• 申請（專利權）人: 濱州醫學院
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07J9/00;C07D307/42;C07C67/48;C07C69/732;C07H15/203;C07H1/08;C07C45/78;C07C47/47;C07C47/575;C07D311/94;C07D311/96;C07D311/32
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙)11531
• 代理人: 李宏偉

1.一種山牡荊抗腫瘤化合物的研究方法，其特征在于，包括以下步驟；

S1：探索山牡荊有效成分的最佳提取方法，應用傳統提取方法、超聲波提取方法、微波提取方法和超臨界流體萃取提取方法分別對山牡荊有效成分進行提取，選取最佳的提取方法；

S2：對山牡荊中的有效成分進行分離和純化，采用有效的分離方法對山牡荊中的有效成分進行分離制備；

S3：將分離出的山牡荊有效成分進行結構鑒定，利用化學手段和現代儀器技術對分離得到的山牡荊各成分進行鑒定；

S4：篩選對山牡荊最敏感的腫瘤細胞和有效的抗腫瘤藥物濃度，并進行抗腫瘤細胞實驗，配制不同濃度的山牡荊提取物，進行山牡荊體外抗腫瘤活性實驗，篩選對山牡荊和單葉蔓荊最為敏感的腫瘤細胞和有效的抗腫瘤藥物濃度，并用最敏感的腫瘤細胞進行有效成分抗腫瘤細胞實驗，確定抗腫瘤活性成分的抗腫瘤效果；

S5：進行活體抗腫瘤實驗；

S6：對化合物進行結構改造，發掘山牡荊抗腫瘤化合物，以活性較好的化合物作為先導化合物，通過進一步的結構簡化，考察分子中各結構片段對抗腫瘤活性的影響，并利用化學手段，結合計算機輔助藥物設計及構效關系研究，對其進行結構改造，合成大量化合物，結合活性評價，發掘抗腫瘤效果好的山牡荊化合物。

2.根據權利要求1所述的一種山牡荊抗腫瘤化合物的研究方法，其特征在于，所述山牡荊中有效成分的分離方法采用色譜分離法，所述色譜分離法包括高效液相制備色譜、中壓制備液相色譜和逆流色譜。

3.根據權利要求1所述的一種山牡荊抗腫瘤化合物的研究方法，其特征在于，所述活體抗腫瘤實驗的具體方法為：選用對山牡荊抗腫瘤成分最敏感的腫瘤細胞構建小鼠腫瘤模型，將山牡荊和單葉蔓荊抗腫瘤成分的高、中、低三個劑量設為實驗組，以生理鹽水為空白組進行體內抗腫瘤實驗，定期監測小鼠皮下瘤體生長情況并對動物進行生存觀察，觀察結束后，處死小鼠并取動物腫瘤及相關臟器組織進行HE、免疫組化及凋亡染色，分析動物有無系統性損害。