[發明專利]一種獼猴桃無菌種苗的快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201611022693.X
• 申請日: 2016-11-21
• 公開（公告）號: CN108077068B
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 李飛;程帥;張卉;雷瓊
• 申請（專利權）人: 蒲江橙海陽光農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王學強;羅滿

本發明公開一種獼猴桃無菌種苗的快速繁殖方法，包括以下步驟：(1)無菌播種：取處理后的獼猴桃種子，接種到初代培養基中，培養3—4周，直至種子萌發并生長形成實生苗；(2)增殖培養：切取步驟(1)所述實生苗的不帶芽點的莖段或葉片，接種于不定芽誘導培養基中，培養4—6周，直至不定芽生成至一定長度；或者切取步驟(1)所述實生苗的帶腋芽或頂芽的莖段，接種于叢生芽誘導培養基中，培養3—5周，直至叢生芽生成至一定長度；(3)壯苗生根培養：將步驟(2)所述不定芽或叢生芽接種至壯苗生根培養基中，培養3—4周，即得獼猴桃無菌種苗。其幼苗培養時間短，生根率高達95％以上，成活率高，幼苗整齊，便于后期統一的移栽和種植管理。

技術領域

本發明涉及生物組培育苗技術領域，具體涉及一種獼猴桃無菌種苗的快速繁殖方法。

背景技術

獼猴桃，也稱奇異果，果形一般為橢圓狀，早期外觀呈綠褐色，成熟后呈紅褐色，表皮覆蓋濃密絨毛，其內是呈亮綠色的果肉和一排黑色或者紅色的種子。因獼猴喜食，故名獼猴桃；亦有說法是因為果皮覆毛，貌似獼猴而得名，是一種品質鮮嫩，營養豐富，風味鮮美的水果。獼猴桃含有獼猴桃堿、蛋白水解酶、單寧果膠和糖類等有機物，以及鈣、鉀、硒、鋅、鍺等微量元素和人體所需17種氨基酸外，還含有豐富的維生素C、葡萄酸、果糖、檸檬酸、蘋果酸、脂肪，具有很高的推廣栽培價值。

現有的獼猴桃砧木栽培一般采用由種子萌發培養的獼猴桃實生苗，獼猴桃種子具有休眠特性，萌發慢，對發芽環境條件要求高，因此生產上使用層積法、變溫處理、激素處理等方法來促進其萌發。雖然這些方法能提高其發芽率，縮短了萌芽時間，但仍不能滿足快速培育健壯獼猴桃實生苗的大量需求。

發明內容

有鑒于此，本申請提供一種獼猴桃無菌種苗的快速繁殖方法，其幼苗培養時間短，增殖速率快，生根率高達95％以上，成活率高，幼苗整齊，便于后期統一的移栽和種植管理；本方法可實現獼猴桃無菌種苗的快速繁殖。

為解決以上技術問題，本發明提供的技術方案是一種獼猴桃無菌種苗的快速繁殖方法，所述快速繁殖方法包括以下步驟：

(1)無菌播種：取處理后的獼猴桃種子，接種到初代培養基中，培養3—4周，直至種子萌發并生長形成實生苗；

(2)增殖培養：切取步驟(1)所述實生苗的不帶芽點的莖段或葉片，接種于不定芽誘導培養基中，培養4—6周，直至不定芽生成至一定長度；

或者切取步驟(1)所述實生苗的帶腋芽或頂芽的莖段，接種于叢生芽誘導培養基中，培養3—5周，直至叢生芽生成至一定長度；

(3)壯苗生根培養：將步驟(2)所述不定芽或叢生芽接種至壯苗生根培養基中，培養3—4周，即得獼猴桃無菌種苗。

優選的，步驟(1)所述初代培養基的組成為：MS基本培養基，補充0.1—1.0mg/LGA3、1.0mg/LPVP、25g/L蔗糖、6g/L瓊脂。

更為優選的，步驟(1)所述初代培養基的組成為：MS基本培養基，補充0.5mg/LGA3、1.0mg/LPVP、25g/L蔗糖、6g/L瓊脂。

優選的，步驟(1)所述獼猴桃種子的處理方法為：在無菌操作臺上，將獼猴桃種子先用75％酒精處理20—40s，用無菌水清洗3—4次，再用0.1％的升汞處理10—13min，用無菌水清洗5—7次，晾干即可。

更為優選的，所述獼猴桃種子取自日本紅心獼猴桃果實，在取獼猴桃種子之前，先將日本紅心獼猴桃果實在1—5℃下冷藏3—7天。通過低溫冷藏使種子破除休眠，便于種子的萌發。

優選的，步驟(2)所述不定芽誘導培養基的組成為：MS基本培養基，補充0.01—0.5mg/L TDZ、30g/L蔗糖、6g/L瓊脂。

更為優選的，步驟(2)所述不定芽誘導培養基的組成為：MS基本培養基，補充0.05mg/L TDZ、30g/L蔗糖、6g/L瓊脂。