[發明專利]一種人附睪蛋白4化學發光酶免疫定量測定試劑盒及應用

在審

• 申請號: 201611022420.5
• 申請日: 2016-11-17
• 公開（公告）號: CN106841630A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 陸上蘇;孫旭;李孟;徐恒;陶艷茹;趙燦
• 申請（專利權）人: 南京健安醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司32224
• 代理人: 薛海霞,董建林

1.一種人附睪蛋白4化學發光酶免疫定量測定試劑盒，包括盒體、設在盒體內的化學發光板和設在盒體內的試劑，其特征在于：化學發光板包被有抗HE4的抗體；試劑包括：HE4系列標準品溶液，HE4系列質控品溶液，樣本稀釋液，生物素標記抗HE4抗體，辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈酶親和素，酶稀釋液，化學發光溶液A、B液，濃縮洗滌液。

2.根據權利要求1所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：所述的化學發光板為乳白色不透明聚苯乙烯96孔化學發光板，各孔包被有抗HE4的抗體，抗體包被濃度為5.0 μg/mL。

3.根據權利要求1所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：試劑盒的檢測樣本為人血清樣本。

4.根據權利要求1所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：HE4系列標準品溶液濃度分別為：0、50、70、250、500、1800 pmol/L。

5.根據權利要求4所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：HE4系列質控品溶液濃度分別為：250±80、70±14pmol/L。

6.根據權利要求1所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：生物素標記抗HE4抗體由HE4抗體與生物素偶合制成，并作為檢測抗體。

7.根據權利要求5所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：濃縮洗滌液是含有體積分數0.05 %吐溫-20的pH=7.4，0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液。

8.根據權利要求7所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：化學發光溶液A液為魯米諾含量為0.01M、對甲苯酚含量為0.001M pH=8.8的三(羥甲基)氨基甲烷溶液；化學發光溶液B液為每 100 mL溶液含檸檬酸2.1g，無水 Na₂HPO₄ 2.82g，0.75%的過氧化氫脲 0.64mL 的水溶液，所述百分比為質量百分比。

9.根據權利要求1所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒，其特征在于：包括如下試劑：

HE4標準品溶液：將HE4抗原純品用抗原稀釋液配制成濃度分別為0、50、70、250、500、1800 pmol/L的HE4系列標準品溶液；

HE4質控品溶液：將HE4抗原純品用抗原稀釋液配制成濃度分別為250、70 pmol/L的質控品溶液；

生物素標記抗HE4抗體：將生物素與抗體進行偶聯透析后獲得的生物素標記抗HE4抗體，用抗體稀釋液稀釋成1:2000 的工作濃度作為檢測抗體；

抗原稀釋液：為含有BSA，蔗糖的0.05 mol/L磷酸鹽緩沖液，pH=7.4，是每升含有20 g BSA，50 g蔗糖，8 g NaCl，0.2 g KCl，0.24 g KH₂PO₄，1.44 g Na₂HPO₄的水溶液；

抗體稀釋液：為含有蔗糖的0.05 mol/L磷酸鹽緩沖液，pH=7.4，是每升含有50 g蔗糖，8 g NaCl，0.2 g KCl，0.24 g KH₂PO₄，1.44 g Na₂HPO₄的水溶液；

化學發光溶液：A液為魯米諾含量為 0.01M、對甲苯酚含量為 0.001M，pH=8.8的三(羥甲基)氨基甲烷溶液，B液為每100mL溶液含檸檬酸2.1g，無水Na₂HPO₄ 2.82g，0.75%的過氧化氫脲 0.64mL 的水溶液；

濃縮洗滌液：按體積分數0.05%將吐溫-20添加至pH=7.4， 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液中；

包被溶液：1.59 g 碳酸鈉和 2.53 g 碳酸氫鈉溶于1 L水中，調節pH=9.5；

封閉溶液： 10 g BSA 溶于 1L 洗滌溶液中，再加入重量比為 5‰的 P300；

標記液：1.59 g 碳酸鈉和 2.53 g 碳酸氫鈉溶于1 L水中，調節pH=9.5；

透析液：0.24 g磷酸二氫鈉、1.44g磷酸氫二鈉、8g氯化鈉、0.2g氯化鉀溶于1L水中，調節PH=7.4。

10.權利要求1-9任意一項所述的人附睪蛋白4化學發光酶免疫檢測試劑盒作為卵巢癌的輔助診斷、監測疾病狀態、反映治療療效的試劑的應用。