[發明專利]一種電化學免疫傳感器及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201611013913.2
• 申請日: 2016-11-15
• 公開（公告）號: CN107037221B
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 周影;雙少敏
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N33/94
• 分類號: G01N33/94;G01N33/543;G01N27/327
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 張福增

本發明提供了一種電化學免疫傳感器及其制備方法和應用，是以適配體/十八硫醇作為功能化基團制備具有親水/疏水性的Janus粒子，并用其修飾玻碳電極，制備得到的電化學免疫傳感器。該方法制備的傳感器可用于β?受體激動劑萊克多巴胺的檢測。該方法提高了電極的靈敏度和選擇性，使電極修飾過程更加簡便，具有良好的穩定性和重現性，并且可以應用于人體尿液中萊克多巴胺的檢測。

技術領域

本發明涉及電化學電極材料制備技術領域，具體涉及一種電化學免疫傳感器的制備方法，以及所制備的傳感器在檢測人體尿液中萊克多巴胺的應用。

背景技術

電化學免疫傳感器將免疫反應的高特異性與電化學分析的高靈敏度相結合，因其樣品消耗量小、靈敏度高及儀器廉價等優點，成為臨床、生物醫藥、環境化學以及食品安全分析中一種有力的分析手段。其中，電極修飾是制備免疫電化學傳感器的關鍵所在。傳統的電極修飾方法需要對電極表面進行層層修飾，過程繁瑣，靈敏度低，新型的修飾方法有待開發。

Janus是古羅馬神話中具有前后兩張臉的神，分別代表過去和將來。1991年DeGenne在諾貝爾獲獎致辭中首次應用它來表示微粒同時具有兩種不同特性。這一術語后用來表示具有各向異性的非中心對稱的顆粒，即Janus Particles。Janus粒子不僅在形狀和外觀上呈現各向異性，在化學組成及性能方面也呈現非對稱性。如Janus粒子的兩個半球面可以同時攜帶表面親/疏水的化學物質，利用Janus粒子的這種特性雙親性可以用來對玻碳電極表面進行修飾，從而開發一種新型的電極修飾方法，制備一種新型電化學免疫傳感器。

發明內容

本發明目的在于提供一種電化學免疫傳感器及其制備方法和應用，該傳感器應具有高的靈敏度和選擇性，電極修飾過程更加簡便，且具有良好的穩定性和重現性，該傳感器可以應用于人體尿液中萊克多巴胺的檢測。

為實現上述目的，本發明提供的一種電化學免疫傳感器，是以適配體/十八硫醇作為功能化基團制備具有獨特親水/疏水性的Janus粒子，并用其修飾玻碳電極表面制得到。

本發明提供的一種電化學免疫傳感器的制備方法，步驟包括：

(1)按體積比10-15:1將濃度為1mmol/L的氯金酸溶液加入帶有回流裝置的燒瓶中，攪拌，加熱到沸騰，然后快速加入濃度為38-40mmol/L的檸檬酸鈉溶液，回流直到溶液變為酒紅色；將燒瓶移出熱源，繼續攪拌，冷卻至室溫，制得納米金溶液，0-5℃下保存備用；

(2)用50％-70％的濃硫酸，20％-30％的雙氧水，按體積比3-4:1配置piranha溶液，將硅片置入溶液中，在70-90℃下加熱煮沸10-20分鐘，清除硅片表面的雜質，取出，用超純水沖洗干凈，備用；

(3)按體積比1:1-1.2將質量分數1-2％的氨基聚苯乙烯微球水溶液分散在無水乙醇中；將分散后的PS微球超聲20-40s；在玻璃培養皿中加入超純水，將處理過的PS微球溶液緩慢滴加在超純水的表面，加入少量十二烷基磺酸鈉溶液使PS微球排列為緊密單層；用步驟(2)制備的硅片撈出排列為單層的PS微球，并使其負著在硅片表面，干燥后備用；

(4)用真空熱蒸鍍儀在步驟(3)制備的單層排列的PS微球的上表面蒸鍍金層，使金層厚度為20-30nm，將其迅速浸入1×10^-3-2×10^-3mol/L十八硫醇溶液中，3-6小時后，用超純水沖洗硅片，除去吸附松散的十八硫醇；用超聲波把修飾好的PS微球從硅片上脫離下來使其分散在超純水中，制備得到Janus粒子溶液，保存備用；

(5)將步驟(4)得到的Janus粒子溶液超聲，使其在溶液中分散均勻，然后吸取分散均勻的Janus粒子溶液緩慢滴加在玻碳電極表面，用紅外燈烤干，用超純水輕輕沖洗，除去吸附松散的Janus粒子，得到Janus粒子修飾電極；