[發明專利]一種比較斷奶仔豬抗應激生理反應能力的標記引物和方法

有效

• 申請號: 201611010663.7
• 申請日: 2016-11-15
• 公開（公告）號: CN106636356B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 丁月云;殷宗俊;張曉東;陳偉平;張威;黃龍;楊敏;胡洪;王源朗;朱樹嬌;張德磊;吳濤
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 北京雙收知識產權代理有限公司 11241
• 代理人: 王菊珍

1.一種比較斷奶仔豬血清GA、Cor含量以及小腸絨毛高度差異的標記引物，其特征在于：該引物對包括GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R；其中，

引物對GLS，正向引物序列如SEQ ID NO. 1所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示；

引物對EGFR，正向引物序列如SEQ ID NO. 3所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 4所示；

引物對IGF-1，正向引物序列如SEQ ID NO. 5所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示；

引物對IGF-1R，正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示。

2.一種比較斷奶仔豬血清GA、Cor含量以及小腸絨毛高度差異的方法，其特征在于：該方法以與血清GA含量分別呈正相關的候選基因GLS和EGFR的表達水平比較不同斷奶仔豬個體血清GA含量差異、與血清Cor含量分別呈正相關的候選基因GLS和EGFR的表達水平比較不同斷奶仔豬個體血清Cor含量差異，與小腸絨毛高度分別呈正相關的候選基因IGF-1、IGF-R的表達水平比較不同斷奶仔豬個體小腸絨毛高度差異。

3.一種比較斷奶仔豬腸道發育狀況的方法，其特征在于：該方法以與斷奶仔豬腸道生長發育相關聯的血清GA、Cor含量、仔豬小腸絨毛高度為對象，通過分析與血清GA含量呈正相關的候選基因GLS和EGFR的表達水平、與血清Cor含量呈正相關的候選基因GLS和EGFR的表達水平，與小腸絨毛高度分別呈正相關的候選基因IGF-1、IGF-R的表達水平，判定斷奶仔豬腸道發育狀況，標記基因表達水平高的斷奶仔豬比標記基因表達水平低的斷奶仔豬腸道發育更良好。

4.權利要求3所述的比較斷奶仔豬腸道發育狀況的方法，其特征在于：該方法具體包括如下步驟：（1）斷奶仔豬小腸總RNA提取；（2）引物設計：分別設計候選基因GLS的反轉錄引物對GLS、候選基因EGFR的反轉錄引物對EGFR、候選基因IGF-1的反轉錄引物對IGF-1、候選基因IGF-1R的反轉錄引物對IGF-1R；（3）反轉錄合成cDNA：使用反轉錄試劑盒對步驟（1）得到的總RNA進行反轉錄合成cDNA；（4）采用步驟（2）的引物通過q-RT-PCR方法測定候選基因GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R在斷奶仔豬個體小腸中的表達量；（5）根據各候選基因在不同斷奶仔豬個體的表達量的差異確定不同斷奶仔豬腸道發育狀況；

其中，引物對GLS，正向引物序列如SEQ ID NO. 1所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示；

引物對EGFR，正向引物序列如SEQ ID NO. 3所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 4所示；

引物對IGF-1，正向引物序列如SEQ ID NO. 5所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示；

引物對IGF-1R，正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示。