[發(fā)明專利]測定甘草制雪膽中雪膽素甲含量的HPLC方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611008731.6
• 申請(qǐng)日: 2016-11-16
• 公開（公告）號(hào): CN108072707B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫繼林;胡昌江;李藝丹;張婷婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川輔正藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;左翔

本發(fā)明公開了一種測定甘草制雪膽中雪膽素甲含量的HPLC方法，它包括以下步驟：(1)雪膽素甲標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：a、對(duì)照品溶液的制備；b、對(duì)照品溶液的測定；(2)待測樣品中雪膽素甲的含量測定：c、供試品溶液的制備；d、供試品溶液的測定。本發(fā)明成功建立了測定甘草制雪膽中雪膽素甲含量的HPLC方法，可以簡便、快速、準(zhǔn)確地測定甘草制雪膽中雪膽素甲的含量，可以監(jiān)控甘草制雪膽中的活性成分含量，真實(shí)地反映藥品的內(nèi)在質(zhì)量，為甘草制雪膽的質(zhì)量控制提供了有效保障。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥材檢測領(lǐng)域，具體涉及甘草制雪膽中雪膽素甲含量的HPLC方法。

背景技術(shù)

雪膽為葫蘆科雪膽屬植物長果雪膽Hemsleya dolichocarpa W.J.Chang、峨眉雪膽Hemsleya omeiensis L.T.Shen et W.J.Chang或巨花雪膽Hemsleya giganthaW.J.Chang的干燥塊根。

甘草制雪膽為用質(zhì)量比0.4倍量的甘草汁悶潤7.5h后，80℃烘干12h后晾干的雪膽制品。甘草制雪膽具有清熱解毒，消炎止痛的功效，用于治療菌痢，腸炎，支氣管炎，急性扁桃體炎，虛火牙痛，胃痛等疾病。

現(xiàn)代研究表明，雪膽主要含雪膽甲素及少量雪膽乙素和皂苷成分，主要用于治療菌痢、腸炎、支氣管炎及急性扁桃體炎等疾病。其中雪膽素甲含量較高，為其主要有效成分。

因此，為了確保甘草制雪膽的質(zhì)量和安全，需要一種能準(zhǔn)確、可靠測定甘草制雪膽中雪膽素甲含量的方法。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種測定甘草制雪膽中雪膽素甲含量的HPLC方法，它包括以下步驟：

(1)雪膽素甲標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：

a、對(duì)照品溶液的制備：

取雪膽素甲對(duì)照品，加甲醇配制成對(duì)照品溶液；

b、對(duì)照品溶液的測定：

配制系列濃度的對(duì)照品溶液，分別注入高效液相色譜儀檢測，測定色譜峰面積，得到雪膽素甲的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

色譜條件如下：

色譜柱：C18色譜柱；

檢測波長：210nm；

流動(dòng)相：乙腈-水，體積比為35：65；

(2)待測樣品中雪膽素甲的含量測定：

c、供試品溶液的制備：

取待測樣品，加甲醇提取，過濾得供試品溶液；

d、供試品溶液的測定：

取供試品溶液，注入高效液相色譜儀，以步驟b相同的色譜條件檢測，根據(jù)步驟(1)的標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測樣品中雪膽素甲的含量。

進(jìn)一步地，所述色譜條件的柱溫為25℃～35℃，優(yōu)選30℃。

進(jìn)一步地，所述色譜條件的流速0.8～1.2mL/min；優(yōu)選流速1.0mL/min。

進(jìn)一步地，所述色譜柱的規(guī)格為：內(nèi)徑4.6mm，長度250mm，填料粒徑5μm。

進(jìn)一步地，所述色譜柱為Diamonsil-C18柱。

進(jìn)一步地，步驟(3)中，所述甲醇的濃度為70％。

進(jìn)一步地，步驟(3)中，所述提取是超聲提取或回流提取。

進(jìn)一步地，步驟(3)中，所述提取是超聲提取30分鐘。

進(jìn)一步地，步驟(3)中，所述甲醇與待測樣品的體積質(zhì)量比為50mL：1g。