[發(fā)明專利]一種基于溫度變化定量檢測目標(biāo)物的分析方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611004607.2
• 申請日: 2016-11-15
• 公開（公告）號: CN106568956B
• 公開（公告）日: 2018-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林振宇;馬小明;劉銀金;陳超群;郭隆華;邱彬
• 申請（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N25/20
• 代理公司: 福州君誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35211
• 代理人: 李春連

本發(fā)明公開了一種基于溫度變化定量檢測目標(biāo)物的分析方法，可用于癌癥標(biāo)記物的高靈敏定量檢測。所述方法是在密閉的體系中，對目標(biāo)物進(jìn)行特異性的識別，在目標(biāo)物檢測抗體上面修飾上信號放大分子，該信號放大分子能夠催化底物分解釋放出氣體，導(dǎo)致該密閉體系內(nèi)氣壓變化，從而推動(dòng)儲液器中的液體進(jìn)入熱反應(yīng)器中，隨即熱反應(yīng)器中的熱反應(yīng)試劑與所述液體混合后釋放出大量的熱，利用熱量所致的溫度變化實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)物的高靈敏定量檢測。本發(fā)明能夠準(zhǔn)確高效地定量測定目標(biāo)物濃度，并且目標(biāo)物的濃度信號可以通過目視法直接獲取，無需借助大型儀器，該方法解決了目前大部分高靈敏地定量檢測靶標(biāo)都需要借助于昂貴的儀器及專業(yè)技術(shù)人員等不足。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于溫度變化定量檢測目標(biāo)物的分析方法，可用于癌癥標(biāo)記物的高靈敏定量檢測。

背景技術(shù)

定量分析檢測對于食品安全以及醫(yī)學(xué)檢測等領(lǐng)域有著至關(guān)重要的意義，快速靈敏的分析檢測能夠及時(shí)甄別食品安全危害以及重大傳染性疾病，為健康和諧的社會(huì)發(fā)展提供了保障。現(xiàn)有的定量檢測分析方法，例如光譜儀、質(zhì)譜儀、色譜儀、電泳等，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品等眾多領(lǐng)域的樣品檢測和分析中。然而，使用這些儀器大多數(shù)需要專業(yè)的訓(xùn)練，并且他們造價(jià)昂貴，維護(hù)成本高。因此發(fā)展新穎、靈敏、高選擇性、廉價(jià)、方便的定量檢測分析方法，一直是科研工作中最為熱門的課題。

綜上所述，在未來的科學(xué)研究中，發(fā)展一種既不影響實(shí)驗(yàn)方法高靈敏度、高選擇性、高準(zhǔn)確性等優(yōu)點(diǎn)，又能顯著降低檢測儀器和實(shí)驗(yàn)成本，既能實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室中高靈敏、高準(zhǔn)確性的實(shí)驗(yàn)要求，又具有微型化、便攜低能耗等優(yōu)點(diǎn)，可應(yīng)用于即時(shí)診斷的的定量檢測分析方法是亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種基于溫度變化定量檢測目標(biāo)物的分析方法，能夠準(zhǔn)確高效地定量測定靶標(biāo)濃度，并且待測物的濃度信號可以通過目視法直接獲取，無需借助大型儀器。該方法解決了目前大部分高靈敏地定量檢測靶標(biāo)都需要借助于昂貴的儀器及專業(yè)技術(shù)人員等不足，僅依靠家用常見的溫度計(jì)就可以對癌癥標(biāo)記物進(jìn)行快速靈敏可視化檢測。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種基于溫度變化定量檢測目標(biāo)物的分析方法，所述方法是在密閉的體系中，采用抗原抗體三明治結(jié)構(gòu)，對目標(biāo)物(例如癌胚抗原CEA)進(jìn)行特異性的識別，在目標(biāo)物(例如CEA)檢測抗體上面修飾上的信號放大分子能夠催化底物分解釋放出氣體，導(dǎo)致該密閉體系內(nèi)氣壓變化，從而推動(dòng)儲液器中的液體進(jìn)入熱反應(yīng)器中，隨即熱反應(yīng)器中的熱反應(yīng)試劑與所述液體混合后釋放出大量的熱，利用熱量所致的溫度變化實(shí)現(xiàn)對(CEA)目標(biāo)物的高靈敏定量檢測。

所述特異性識別分子對靶標(biāo)進(jìn)行識別，如抗原/抗體特異性檢測系統(tǒng)。

所述信號放大分子包括過氧化氫酶、鉑納米顆粒、金鉑納米顆粒等具有催化活性的納米材料、納米材料復(fù)合物或酶等，其能夠催化底物(例如雙氧水)分解釋放出大量的氣體，且釋放出的氣體無毒無害(例如氧氣)。

所述儲液器中存在大量的能夠與熱反應(yīng)器中的熱反應(yīng)試劑進(jìn)行反應(yīng)的液體。

所述熱反應(yīng)器中的熱反應(yīng)試劑可以和儲液器中的液體混合釋放出熱量，例如，氧化鈣/水、氫氧化鈉/水等。

所述熱反應(yīng)器中產(chǎn)生的熱量變化能夠被熱量感應(yīng)儀器檢測出來。

所述熱量感應(yīng)儀器為溫度計(jì)或便攜式紅外溫度檢測器等。

進(jìn)一步，在酶聯(lián)免疫吸附法體系中，基于溫度變化定量檢測靶標(biāo)的分析方法，具體包括如下步驟：

(1)在信號放大分子上面修飾有能夠與CEA檢測抗體特異性共價(jià)鍵合的識別單元，實(shí)現(xiàn)信號輸出的目的；

(2)將CEA捕獲抗體修飾在固體基質(zhì)上面，然后對空白位點(diǎn)進(jìn)行封堵，隨后加入待檢測物質(zhì)，再加入CEA檢測抗體，孵育一段時(shí)間后，洗滌、拍干、待用；