[發(fā)明專利]新型beta?腎上腺素受體激動劑通用半抗原的合成及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611000497.2
• 申請日: 2016-11-15
• 公開（公告）號: CN107337610A
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙波;邵科峰;陳明
• 申請（專利權(quán)）人: 南京量子化工科技有限公司
• 主分類號: C07C227/18
• 分類號: C07C227/18;C07C229/34;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/533;G01N33/535;G01N33/577
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于有機合成和分析化學技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種新型beta-腎上腺素受體激動劑（以下簡稱beta-激動劑）通用半抗原的合成及其在beta-激動劑多殘留檢測方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

Beta-腎上腺素受體激動劑，簡稱beta-激動劑，是動物源性食品中檢出率最高、危害最嚴重的化學性殘留危害物，其中最著名的就是克倫特羅（clenbuterol, CL），俗稱“瘦肉精”。上世紀80年代，美國脂胺公司的科研人員意外發(fā)現(xiàn)，“瘦肉精”能增強動物脂肪分解，促進蛋白質(zhì)合成，大大縮短肉品上市周期，顯著提高胴體瘦肉率、飼料回報率和經(jīng)濟效益。隨后在世界各地迅速推廣，80年代后期，傳入我國并在許多地區(qū)的飼料加工企業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)推廣使用，很快成為養(yǎng)殖業(yè)應(yīng)用最廣泛的“添加劑”。

“瘦肉精”除克倫特羅外，還包括沙丁胺醇（salbutamol, SAL）、萊克多巴胺（ractopamine, RAC）等20多個結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相類似的化合物。這類化合物進入體內(nèi)后選擇性作用于腺苷酸環(huán)化酶，導致人體產(chǎn)生低敏感現(xiàn)象，哮喘發(fā)生率和發(fā)病程度升高；還可導致內(nèi)分泌紊亂，誘發(fā)染色體畸變及惡性腫瘤，嚴重時可致人死亡。因此我國和世界上大多數(shù)國家都明文禁止“瘦肉精”用作飼料添加劑。

目前，beta-激動劑類獸藥殘留的檢測方法主要包括高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）、酶聯(lián)免疫法（ELISA）和熒光免疫法（FIA）等。

色譜法是β-激動劑獸藥殘留的主要檢測方法，但是色譜法檢測成本高、操作復雜、大量的陰性樣品重復檢測；而酶聯(lián)免疫法具有特異性強、樣品前處理簡單等優(yōu)點，但特異性強的特點同時也決定了它的致命缺點：一種酶聯(lián)免疫試劑盒或試紙條只能檢測一種獸藥殘留，而無法檢測其它的同類獸藥殘留，這就是容易出現(xiàn)漏檢的原因（如2011年轟動全國的“雙匯瘦肉精”事件）；此外，隨著beta-激動劑多種替代品的出現(xiàn)，如果進行完全檢測，一個樣品需要使用多種檢測產(chǎn)品，大大提高了檢測成本和工作時間，失去了快速篩選的意義。

多殘留免疫分析能同時檢測一類藥物殘留，其低成本、高通量、快速現(xiàn)場的優(yōu)點是現(xiàn)有的色譜法和特異性免疫方法無法比擬的，是未來食品安全檢測領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)之一，逐漸引起重視。多殘留免疫分析主要有三種方法：通用半抗原、多決定簇抗原和混合抗體。混合抗體法是利用多種特異性抗體實現(xiàn)對多個化合物同時檢測的目的；多決定簇抗原是在載體蛋白上偶聯(lián)多種待測小分子半抗原，制備能識別這些小分子的抗體而進行多殘留檢測。這兩種方法最大的缺點就是重復性差。而通用半抗原具有另外兩種方法難以比擬的優(yōu)點，因此是多殘留免疫分析的首選方法，通用半抗原的分子設(shè)計與合成是其核心環(huán)節(jié)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一類新型beta-激動劑通用半抗原，所述通用半抗原的結(jié)構(gòu)如式I所示：

(I)

其中：

R₁和R₂各自獨立地選自氫原子、羥基、羥甲基、氰基、氨基或氨甲基；

X表示亞甲基或氧原子；

R₃表示任意取代的C1-C10的烷基；

R₄表示-(CH₂)_n-Y，其中Y表示羧基、氨基或者羥基，n為2~6的整數(shù)。

本發(fā)明提供的beta-激動劑通用半抗原，優(yōu)選地，具有如式(II)所示結(jié)構(gòu)：

(II)

其中，R₁為氫原子，R₂為氫原子或羥基，R₃為環(huán)丙基、異丙基或叔丁基。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種合成如式(I)及式(II)所示的通用半抗原過程中的中間體的制備方法（路線A），包括以下步驟：

（1）式(III)化合物酰化得到式(IV)化合物，式(III)中R₁為氫原子，R₂為氫原子或羥基，式(IV)中X為氯或溴。?；噭┛梢詾槁纫阴Ｂ?、氯乙酰溴、溴乙酰氯或溴乙酰溴，在適當?shù)拇呋瘎┤缛然X、三氟化硼等催化下進行。反應(yīng)可在適當溶劑如二氯甲烷、三氯甲烷等中于0 ⁰C到60 ⁰C的溫度下進行。

(III)(IV)