[發明專利]熒光免疫層析測試數據處理方法

有效

• 申請號: 201611000283.5
• 申請日: 2016-11-14
• 公開（公告）號: CN107389626B
• 公開（公告）日: 2020-01-17
• 發明（設計）人: 倪曉濤;李歡;王佩瑞;陸亮;肖琨;周亦迪;曹秋岑
• 申請（專利權）人: 上海艾瑞德生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 31266 上海一平知識產權代理有限公司
• 代理人: 徐嘉慧;陸鳳

本發明提供了一種處理熒光免疫層析測試數據的方法，包括提供一免疫層析試紙條、一激發光源和一受激光讀取裝置，通過所述控制裝置，控制光斑從而使得所述光斑沿所述層析試紙條的長度方向進行移動，將對應于有效光斑的各信號強度進行數據處理，從而獲得免疫層析試紙的檢測結果。本發明方法排除了質控線上引入的批次間樣品損失量、批次間加樣量差異、抗體標記過程中的部分干擾因素等，使得最終的數據結果具有合理的物理意義和更高的靈敏度。

技術領域

本發明屬于檢測領域，具體地說，本發明涉及一種熒光免疫層析測試數據優化處理方法。

背景技術

在色譜分析、原子吸收、核磁等領域，參照檢測儀器的線性范圍和靈敏度，選用峰高和峰面積都可以用作精準的定量方法。

目前輸出的譜圖(圖2(d))中，各處信號強度未做任何處理，直接輸出的結果包含了部分重復讀取的熒光信號，樣本的數據處理方式是采用TAP法進行計算，其中TA、CA分別表示現有譜圖中測試線和質控線上信號峰的積分面積，其物理意義是將圖2中光斑與測試線、質控線相交的陰影部分面積反饋的信號進行積分加和，因此在TA和CA的計算中部分測試線和質控線上的局部熒光信號區會在光斑移動前后被重復計算多次(約20次)。圖3(a) 所示，光斑從左至右移動，得到圖2(d)所示圖譜，光斑圓心在測試線中點處時，反饋的信號強度值最大。圖3(b)中紅色光斑與測試線相交反饋的有效信號表示為區域1，光斑繼續移動到黃色標識位置處，此時反饋的有效信號是區域1+2，此時區域1即是重復讀取的信號，區域2為增值信號強度。當光斑繼續移動時，區域1和區域2都會成為重復信號。直接將重復讀取的信號進行數據計算，物理意義不明確，并且實驗結果不準確。

在儀器輸出的譜圖中，各數據點反饋的信號強度表示該處光斑與測試線相交時陰影面積覆蓋的所有熒光信號；當光斑移動距離小于光斑直徑時，會有部分之前陰影面積覆蓋的熒光信號被重復讀取。此外，選用質控線進行定量計算，引入了質控線上的干擾因素，容易產生較大的批間誤差。由于微球的添加量(約為0.2-0.4μL)較少，在加樣時容易因為微球附著于加樣槍頭而產生批間添加量的誤差，或是在制備過程中樣品批間損失率不一致，使得最終添加的微球總量存在差異。雖然微球在測試時是過量的，當批間添加量不同時，微球與測試線上的結合量基本一致，但與質控線上的結合量卻存在較大的差異，最終計算數據時，就會使得批間樣品的差異變大，數據可比性降低。

綜上所述，本領域迫切需要研發出一種物理意義明確，并且能夠直觀反映樣品最高信號強度和總信號強度的數據處理方式，同時排除質控線上伴隨著的批次間樣品損失量、批次間加樣量差異、抗體標記過程中的部分干擾因素等，減少重復讀取的熒光信號對實驗結果的誤差。

發明內容

本發明的目的在于提供一種熒光免疫層析測試數據優化處理方法。

本發明第一方面，提供一種熒光免疫層析測試數據的處理方法，包括步驟：

(1)提供一免疫層析試紙條、一激發光源和一受激光讀取裝置，其中，

所述激發光源用于產生激發光，所述激發光被照射在所述層析試紙條上，從而形成光斑；

并且所述的激發光源配有控制裝置，用于控制所述的免疫層析試紙條和所述激發光源的相對位置，從而使得所述光斑沿所述層析試紙條的長度方向進行移動；

其中，所述的免疫層析試紙條設有測試線，其中，所述試紙條長度為L₀，寬度為W₀，所述測試線長度為L_t；

(2)使所述激發光源產生激發光，照射在所述層析試紙條的近端上，從而形成光斑，并通過所述受激光讀取裝置讀取光斑區域發出的受激光；

(3)通過所述控制裝置控制光斑在試紙條上沿層析試紙條的近端至遠端方向，從當前位置移動到下一位置，并讀取下一位置處光斑區域發出的受激光，移動步長為S_t；