[發明專利]一種獼猴桃根部內生放線菌的分離及其應用

有效

• 申請號: 201610999919.5
• 申請日: 2016-11-14
• 公開（公告）號: CN106635884B
• 公開（公告）日: 2019-11-29
• 發明（設計）人: 辜運富;吳海冰;彭漪;尼瑪扎西;劉松青;陳強
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01N63/02;A01P1/00;A01P3/00;A01P21/00;C05F11/08;C05G3/00;C05G3/04;C12R1/465
• 代理公司: 11246 北京眾合誠成知識產權代理有限公司
• 代理人: 夏艷<國際申請>=<國際公布>=<進入國

本發明公開了一種獼猴桃根部內生放線菌菌及其應用，獼猴桃根部內生放線菌為球孢鏈霉菌，命名為球孢鏈霉菌SCAU?1，保藏編號為CCTCC NO：M 2016577。本發明從患潰瘍病獼猴桃植株根部中分離出的功能內生放線菌菌，不僅促進植物生長也可以明顯抑制植物病原真菌和病原細菌的生長的能力，可用于“肥藥兼效型”微生物肥料的制作，促進獼猴桃的生長；連續三次盆栽實驗顯示SCAU?1發酵液經清水稀釋后，采用灌根方式對獼猴桃苗表現出明顯的促生作用，能夠明顯提高獼猴桃苗期的根數、根長、株高、葉片數量和葉面積。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，尤其涉及一種獼猴桃內生放線菌的分離及其應用。

背景技術

獼猴桃營養非富，汁多味美，被人們譽為“水果之王”，是理想的綠色食品，近年來需求日益增加。但是因為果農一味追求高產，采用不科學的栽培管理方式，如氮磷肥的重施、鉀肥的輕施，有機肥的缺施等導致獼猴桃易患潰瘍病、葉片黃化病等病害，致使獼猴桃優果率下降、土壤肥力急速削減，嚴重影響獼猴桃產量及品質。

微生物肥料能夠有效的改良土壤肥力，提高化肥的利用率同時提高能源利用率。實踐證明，微生物肥料在綠色有機食品生產、農業生態環境保護以及高產、優質、高效農業的持續發展中發揮著重要的作用。微生物肥料的功能核心是有益微生物，施入土壤后，能固定空氣中的氮素，活化土壤中的養分，改善植物的營養環境，微生物在生命活動過程中產生活性物質，刺激植物的生長。但是當前的微生物肥料普遍存在功能單一、菌株活性退化的問題，因此，挖掘新的功能微生物對于多功能微生物肥料的研發具有重要意義。

內生菌是一類生活在活體植物組織內、不會引起植物明顯病害的微生物，能作為外源基因的載體，具有促進植物生長、抗逆境、抗病害、增加宿主植物的他感作用以及對病蟲害的防治等作用。獼猴桃根部內生菌豐富，而患病植株會誘導自身根部的微生物群落發生響應變化，以患潰瘍病的獼猴桃植株根部為分離材料，可以提高具有潛在抗病促生的功能微生物的分離效率。以患潰瘍病的獼猴桃植株根部為分離源，進行內生放線菌的分離篩選對于挖掘新的具有抗病促生復合功能的微生物菌種資源并應用于新型復合微生物菌劑的開發具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種獼猴桃內生放線菌及其應用，通過綜合評價篩選獼猴桃內部放線菌的功能特性，旨在解決當前微生物肥料生產菌種單一、菌株優良性狀退化、獼猴桃專用微生物菌劑環境適應性弱等問題。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：一種獼猴桃根部內生放線菌，所述獼猴桃根部內生放線菌為球孢鏈霉菌，命名為球孢鏈霉菌SCAU-1(Streptomycesglobisporus SCAU-1)，已于2016年10月18日保藏至武漢大學中國典型培養物保藏中心(CCTCC),保藏編號為：CCTCC NO：M 2016577。該菌具有較廣泛的抗菌作用，同時能促進植物生長，兼具“肥藥”雙效功能，使用該菌制成的微生物肥料對于在農業種植業中減少化學肥料和農藥施用具有重要意義。

本發明的另一目的在于一種獼猴桃根部內生放線菌的分離方法，采集患潰瘍病的獼猴桃根部樣品，用0.1％Tween 20清洗30s，無菌水沖洗3次，75％乙醇浸泡5min，無菌水沖洗3次，有效氯含量2％次氯酸鈉溶液浸泡3-5min，無菌水沖洗3次；10％NaHCO₃浸泡10min，無菌水清洗3次，然后研磨成勻漿后接于TSA培養基平板中，在28℃導致培養30d，根據菌落大小、形態和色澤等表觀特征挑取單菌落并進行劃線純化，通過分離獲得32株菌落形態各不相同的菌株。

進一步的，該菌株的生物學特征如下：該菌株對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、丁香假單胞菌、玉米紋枯病菌、西瓜枯黃病菌和番茄早疫病菌具有抑制作用，IAA產量大于40mg/L，可產生纖維素酶。

本發明的另一目的在于一種利用權利要求1所述獼猴桃內生放線菌制備的發酵液。