[發明專利]利用直接質譜成像技術判別蓮子新陳度的方法

有效

• 申請號: 201610993696.1
• 申請日: 2016-11-10
• 公開（公告）號: CN106596698B
• 公開（公告）日: 2019-07-26
• 發明（設計）人: 羅麗萍;鄧敏;羅火林;黃學勇;郭夏麗;于騰輝
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 劉華

本發明公開了一種利用直接質譜成像技術判別蓮子新陳度的方法，包括以下步驟：1)樣品的前處理：將蓮子切片；2)質譜分析；3)成像方法；4)PCA和CA分析；5)分析結果：新鮮蓮子的小分子物質較少，新鮮蓮子中m/z132分子含量低，無法呈現出清晰的影像圖；陳蓮子的小分子物質較為豐富，陳蓮子中m/z132分子含量高，可以呈現清晰的影像圖。本發明采用DAPCI?MS技術獲取蓮子切片的質譜數據，結合surf成像軟件實現對蓮子切片的質譜成像，結合PCA和CA實現對不同年份的蓮子區分。本發明只需將蓮子簡單切片即可進行質譜掃描，可簡單、快速、高效的獲取蓮子樣品信息，對新、陳蓮子快速鑒別。

技術領域

本發明涉及蓮子新陳度的辨別方法，具體地指一種利用直接質譜成像技術判別蓮子新陳度的方法。

背景技術

質譜成像(Imaging Mass Spectrometry，IMS)技術是一種以待測樣品的質譜信息為基礎對待測樣品(一般多為生物組織)進行多點重建來顯示樣品中多種分子的空間分布的成像技術。與其它常見技術(如PET成像、NMR成像及各種光譜成像)相比，質譜成像技術除了具有獲得影像的能力這一基本特點外，還具備了高靈敏度、高特異性和多組分同時檢測、無需放射性核素標記或熒光標記、不使用放射源等優點，可望發展成為理想的分子化學成像工具。

具體步驟：首先將樣品(如病理組織等)進行切片，然后添加一定的基體物質，制備好能夠進行分析的待測樣品；樣品表面任何一點(即最小的采樣面積)均可以進行相應的質譜分析，獲得該點內不同組分的質譜圖。不同的組分由于分子量不同導致質荷比不同，在質譜中出現的位置不同，從而得到了很好的質量分辨。當樣品或采樣點沿著x或y方向移動時，由于不同位點的化學成分不同(雖然光學成像的形貌等可能一樣)，則獲得的質譜信息(如峰的豐度和位置等)不同。如果將質譜信息(如特定質荷比的質譜峰)與樣品中的空間位置進行關聯，則可以獲得該組分的質譜影像。顯然，質譜的影像與其它技術如光譜影像存在較大的區別，而且能夠產生任意指定質荷比(m/z)化合物的二維離子密度圖，對組織中化合物的組成、相對豐度及分布情況進行高通量、全面、快速的分析，可充分展示細節部分，具有更加豐富的信息量。

發明內容

本發明的目的就是要克服現有技術所存在的不足，提供一種利用直接質譜成像技術判別蓮子新陳度的方法。

為實現上述目的，本發明利用直接質譜成像技術判別蓮子新陳度的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)樣品的前處理：將蓮子切片；

2)質譜分析：設置DAPCI離子源為正離子檢測模式，質量范圍為50～700Da，電離電壓為2.5～3.5kV，離子傳輸管溫度為200～300℃；解吸氣(N2)氣壓為0.1～0.3MPa，以α為30度角噴出，解吸氣溫度為150～250℃；噴霧溶劑為甲醇，流速為3.5～4.5μL/min；將蓮子切片置于具有三維調節功能的樣品臺上，使解吸氣出口到測定點距離為1～2mm，測定時線性地改變樣品臺位置，每間隔0.25mm采集一次數據；質譜采集距離為18mm，選定離子的隔離寬度為1.0Da；

3)成像方法：記錄各采樣點的離子凈響應信號的平均值，將各點數據(z值)按其相應空間坐標位置(x，y)輸入Excel工作表中，再由Excel導入到surf軟件中，設置視圖格式為影像視圖，即獲得影像圖；

4)PCA和CA分析：記錄不同年份蓮子的質譜數據，輸入Excel工作表中，再由Excel導入到Matlab 2016a和SPSS 19.0中，得到相應的PCA圖和CA聚類圖；

5)分析結果：從PCA和CA分析可以看出不同年份的蓮子可以按年份聚集在一起；從質譜圖可以看出新鮮蓮子的小分子物質較少，陳蓮子的小分子物質較為豐富；從質譜影像圖可以看出新鮮蓮子中m/z132分子含量低，無法呈現出清晰的影像圖，陳蓮子中m/z132分子含量高，可以呈現清晰的影像圖。