[發明專利]干細胞活性因子在皮膚損傷藥物中的用途

在審

• 申請號: 201610983849.4
• 申請日: 2016-11-08
• 公開（公告）號: CN108066749A
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發明（設計）人: 裴雪濤;張博文;何麗娟;岳文;周軍年;王思涵
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院野戰輸血研究所;華南生物醫藥研究院
• 主分類號: A61K38/18
• 分類號: A61K38/18;A61P17/02;A61K35/28
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一種試劑盒在制備藥物中的用途，其特征在于，所述藥物用于治療全層皮膚損傷，所述試劑盒包括：外泌體和細胞因子。

2.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述試劑盒包括下列至少之一：

堿性成纖維生長因子；以及

表皮生長因子。

3.根據權利要求2所述的用途，其特征在于，所述試劑盒包括：

2～100μg/ml的外泌體；

10～50ng/ml的堿性成纖維生長因子；以及

10～50ng/ml的表皮生長因子。

4.根據權利要求2所述的用途，其特征在于，所述試劑盒包括：

2～50μg/ml的外泌體；

10～30ng/ml的堿性成纖維生長因子；以及

10～30ng/ml的表皮生長因子。

5.根據權利要求2所述的用途，其特征在于，所述試劑盒包括：

5μg/ml外泌體；

10ng/ml的堿性成纖維生長因子；以及

20ng/ml的表皮生長因子。

6.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述外泌體是通過下列步驟所得到的：

將間充質干細胞接種于含有細胞生長培養基的細胞培養皿中，進行培養至所述間充質干細胞處于生長對數期且細胞匯合度達到90％以上，將細胞生長培養基更換為外泌體收集培養基，添加量為6ml/皿，于37℃，5％二氧化碳培養條件下培養細胞48小時，收集培養液；

將所述培養液于4℃，300g離心10分鐘，收集第一上清液；

將所述第一上清液于4℃，2000g離心10分鐘，收集第二上清液；

將所述第二上清液于4℃，10000g離心30分鐘，收集第三上清液；

將所述第三上清液于4℃，110000g離心2小時，收集第一沉淀物；

用35ml PBS緩沖液重懸所述第一沉淀物，并于4℃，110000g離心2小時，收集第二沉淀物；以及

用100～200μl PBS緩沖液重懸所述第二沉淀物，以便得到所述外泌體。

7.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述外泌體及細胞因子是以混合溶液的形式提供的。

8.根據權利要求7所述的用途，其特征在于，所述混合溶液的溶劑為生理鹽水。

9.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述外泌體及細胞因子密封于噴霧瓶。