[發明專利]紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法

有效

• 申請號: 201610980350.8
• 申請日: 2016-11-08
• 公開（公告）號: CN106755227B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 田亞平;胡春芹;龍婧;周楠迪;杜琴
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 姚惠菱

1.一種紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將粉碎的紫菜與蛋白酶在緩沖溶液中發生酶解反應，酶解結束后，離心并取上清液；所述蛋白酶由堿性蛋白酶、中性蛋白酶和氨肽酶組成；所述堿性蛋白酶的含量為7×10⁴-9×10⁴ U.g^-1紫菜，中性蛋白酶的含量為7×10⁴-9×10⁴ U.g^-1紫菜，氨肽酶的含量為25-30 U.g^-1紫菜；所述紫菜為條斑紫菜；

（2）過濾步驟（1）得到的所述上清液，濃縮并干燥濾液，得到固體多肽粉；

（3）將步驟（2）得到的所述固體多肽粉溶于金屬鹽水溶液，發生螯合反應，螯合反應的pH為4.0-5.0，溫度為35-40℃，得到所述紫菜酶解活性肽金屬螯合物；所述金屬鹽為氯化鋅、硝酸鋅或氯化亞鐵。

2.根據權利要求1所述的紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于：在步驟（1）中，酶解反應的溫度為45-55℃。

3.根據權利要求1所述的紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于：在步驟（1）中，所述緩沖溶液的pH為8.0-9.0。

4.根據權利要求1或3所述的紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于：在步驟（1）中，所述緩沖溶液為磷酸鹽緩沖液或Tris-HCl緩沖液。

5.根據權利要求1或3所述的紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于：在步驟（1）中，所述紫菜與緩沖溶液的質量體積比為1:30-1:35 g/ ml。

6.根據權利要求1所述的紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于：在步驟（2）中，依次使用截留分子量為10 kDa-30 kDa的超濾膜和500Da-1kDa的納濾膜進行過濾。

7.根據權利要求1所述的紫菜酶解制備活性肽金屬螯合物的方法，其特征在于：在步驟（3）中，所述固體多肽粉與金屬鹽的質量比為6:1-24:1。

8.權利要求1所述的方法所制備的紫菜酶解活性肽金屬螯合物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應用。