[發明專利]改造抗體-應激蛋白融合物

有效

• 申請號: 201610974080.X
• 申請日: 2007-02-02
• 公開（公告）號: CN106986941B
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: J.A.蓋爾芬德
• 申請（專利權）人: 綜合醫院公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K39/395;A61P29/00;A61P31/00;A61P37/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;萬雪松

本發明涉及改造抗體?應激蛋白融合物。提供了包含改造抗體和應激蛋白的融合多肽，其以高親和力與抗原結合，是高免疫原性的，顯示MHC I類致敏，并且能夠在非哺乳動物細胞例如大腸桿菌中生產。

本申請是申請日為2007年2月2日的中國專利申請200780010776.X“改造抗體-應激蛋白融合物”的分案申請。

政府支持

本發明部分在由Accelerated Drug and Vaccine Development with FormerSoviet Union Institutions in Support of the U.S.Department of StateBioIndustry Initiative授予的Department of State Grant S-LMAQM-04-GR-164的政府支持下進行。因此，美國政府在本發明中擁有某些權利。

技術領域

本發明涉及融合蛋白。具體涉及改造抗體-應激蛋白融合多肽。

背景技術

經典單克隆抗體通常在哺乳動物細胞中生產，這種生產方法的缺點包括生產和選擇合適的克隆的困難，和培養哺乳動物細胞的費用。“下一代”單克隆抗體在大腸桿菌(E.coli)中進行改造。近來，由多肽接頭栓系在一起的V_H和V_L結構域的微生物表達已造成了產生改造的“小型抗體(mini-antibodies)”的能力。這些小型抗體可以在大腸桿菌中以實際上組合的方式來產生。這些人工生成的Fab或單鏈F_V(scFv)可以連接在一起以形成多聚體，例如雙抗體、三鏈抗體和四抗體(tetrabodies)。盡管它們能夠以幾乎抗體樣的效率與抗原結合，但這些改造的、Fc缺陷的小型抗體缺乏與抗原呈遞細胞相互作用的能力并且是弱免疫原性的。

改造抗體的免疫原性缺乏的現有解決方案涉及指導抗原結合部位之一與免疫細胞直接結合。這使它們對合(in apposition)，但不導致相同的MHC I類致敏(priming)，如對于單克隆抗體觀察到的。

發明內容

在一個方面，提供了改造抗體例如Fab或scFv與應激蛋白例如HSP70的融合物。應激蛋白在將抗原呈遞給抗原呈遞細胞且引起T細胞應答方面非常有效。它們在通過這種途徑引發細胞介導的免疫和體液免疫應答方面特別有效。

因此，融合分子以高親和力與抗原結合，是高免疫原性的，顯示MHC I類致敏，引起T細胞應答并且能夠在非哺乳動物系統例如大腸桿菌中生產。融合分子因此適合于用作高免疫原性疫苗用于預防或治療傳染性、炎性、自身免疫性或惡性病。

因此，提供了包含至少一種改造抗體和至少一種應激蛋白的融合多肽。這些包含改造抗體的融合多肽可以是多價的，即它們可以是二價、三價、四價、五價的等。此外，它們可以是單特異性或多特異性的。

還提供了編碼改造抗體-應激蛋白融合多肽的核酸和載體、包含核酸和載體的宿主細胞以及用于生產改造抗體-應激蛋白融合多肽的方法。抗原組合位點或改造抗體片段可以快速且以高親和力產生，并且可以廉價地與應激蛋白融合。

進一步提供了包含主題改造抗體-應激蛋白融合多肽的藥物和疫苗組合物。此種組合物可以進一步包含佐劑或其他試劑。還提供了預防或治療患者中的傳染性、炎性、自身免疫性或惡性病的方法，其包括給有此需要的患者施用有效量的任何一種前述組合物。

用于實踐該方法的試劑盒也在本文中得到描述。

其他特征和優點由于下述詳細描述和權利要求將是顯而易見的。

附圖說明

圖1描述了示例性改造抗體-應激蛋白融合多肽，其包含四價Tandab(改造抗體)和HSP70(應激蛋白)。