[發(fā)明專利]一種有機(jī)熒光染料分子標(biāo)記生物組織的熒光控制方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610964922.3
• 申請(qǐng)日: 2016-10-31
• 公開（公告）號(hào): CN106568753B
• 公開（公告）日: 2019-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 駱清銘;周宏福;劉秀麗;剛亞棟;曾紹群
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64;G01N1/30
• 代理公司: 華中科技大學(xué)專利中心 42201
• 代理人: 許恒恒

1.一種應(yīng)用于層析成像技術(shù)的有機(jī)熒光染料分子標(biāo)記生物組織的熒光控制方法，其特征在于，利用金屬離子與有機(jī)熒光染料分子結(jié)合形成六元環(huán)，淬滅有機(jī)熒光染料分子的熒光，利用金屬離子螯合劑與金屬離子形成配位鍵，破壞金屬離子與有機(jī)熒光染料分子的結(jié)合，重激活有機(jī)熒光染料分子的熒光；所述有機(jī)熒光染料分子為Alexa系列熒光染料分子；

所述的熒光控制方法，其包括如下步驟：

(1)淬滅熒光：將有機(jī)熒光染料分子標(biāo)記的生物組織浸漬在金屬離子化合物的水溶液中，金屬離子與有機(jī)熒光染料分子結(jié)合形成六元環(huán)，從而降低熒光發(fā)色團(tuán)的共軛π電子云密度以淬滅有機(jī)熒光染料分子的熒光，獲得熒光淬滅的生物組織；

(2)重激活熒光：將步驟(1)獲得的熒光淬滅的生物組織浸漬在金屬離子螯合劑中，金屬離子螯合劑與金屬離子形成配位鍵，破壞金屬離子與有機(jī)熒光染料分子的結(jié)合，重激活有機(jī)熒光染料分子的熒光；其重新激活后的熒光強(qiáng)度能夠達(dá)到淬滅狀態(tài)的熒光強(qiáng)度的10倍以上。

2.如權(quán)利要求1所述的熒光控制方法，其特征在于，所述有機(jī)熒光染料分子為Alexa488、Alexa 514、Alexa 532和/或Alexa 546中的一種或多種。

3.如權(quán)利要求1所述的熒光控制方法，其特征在于，所述金屬離子化合物為過渡金屬離子化合物。

4.如權(quán)利要求3所述的熒光控制方法，其特征在于，所述過渡金屬離子化合物為Cr²⁺、Mn²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Co²⁺、Ni²⁺、Cu⁺和/或Cu²⁺中的一種或多種的化合物。

5.如權(quán)利要求3所述的熒光控制方法，其特征在于，所述過渡金屬離子化合物為Fe³⁺的化合物。

6.如權(quán)利要求3所述的熒光控制方法，其特征在于，所述過渡金屬離子化合物為Fe₂(SO₄)₃或FeCl₃。

7.如權(quán)利要求3所述的熒光控制方法，其特征在于，所述過渡態(tài)金屬離子的濃度為10mmol/L～500mmol/L。

8.如權(quán)利要求1所述的熒光控制方法，其特征在于，所述金屬離子螯合劑為EDTA-Na₄、8-羥基喹啉、二甲基二硫代氨基甲酸鈉、N-油酰肌氨酸、原卟啉鈉、二乙二胺和/或去鐵敏中的一種或多種。

9.如權(quán)利要求8所述的熒光控制方法，其特征在于，所述金屬離子螯合劑的濃度為100mmol/L～500mmol/L。