[發明專利]一種用于楊樹擴繁的通用培養基及快速擴繁方法

在審

• 申請號: 201610960078.7
• 申請日: 2016-10-28
• 公開（公告）號: CN106613959A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 李奕稹
• 申請（專利權）人: 內蒙古和盛生態科技研究院有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司11471
• 代理人: 王金寶

技術領域

本發明屬于楊樹擴繁技術領域，具體涉及一種用于楊樹擴繁的通用培養基及快速擴繁方法。

背景技術

楊樹對環境的適應能力強，在我國分布廣泛，無論是肥沃的土地還是貧瘠的山地，均能很好的生長。楊樹具有很高的經濟使用價值和環保價值，其主干通直、材質細密、生長快，是紙漿材原料林的重要樹種之一，也是優良水源涵養林和主要防護林帶的造林樹種之一。但由于許多楊樹嫁接成活率低、扦插生根困難，難以采用常規的無性繁殖方法進行增殖，影響了楊樹的大面積推廣。

為了有效的解決這一難題，我國的學者開始嘗試使用組織培養的方法對楊樹進行增殖。但到目前為止，人們對各品種楊樹的組織培養，多采用各自獨立的培養基，用于楊樹組織培養的通用培養基很少見。

發明內容

為了解決楊樹組織培養中各楊樹品種需分別單獨制作培養基的復雜過程，本發明提供了一種用于楊樹擴繁的通用培養基及快速擴繁方法。所述通用培養基能夠在不同的楊樹品種上使用，使用所述通用培養基的所述快速擴繁方法，操作程序簡便，無需分別單獨制作培養基，使復雜生產工序簡化，工藝成本降低，經濟效益增加。

本發明所采用的技術方案為：一種用于楊樹擴繁的通用培養基，將MS培養基中NH₄NO₃的濃度降低四分之一后作為基礎培養基，并向所述基礎培養基中添加6-BA、NAA、TDZ、蔗糖和瓊脂，得到所述通用培養基，所述通用培養基中6-BA的濃度為0.2-0.4mg/L，NAA的濃度為0.04-0.07mg/L，TDZ的濃度為0.0005-0.0015mg/L，蔗糖的濃度為25-35g/L，瓊脂的濃度為5-6g/L。

本發明按照“先進、適用、經濟”的原則，巧妙地選用合適的激素及其配比，提供一種楊樹組織培養的通用培養基，以滿足楊樹組織培養的技術性能要求，所述通用培養基采用MS培養基為基礎，同時減少了其中NH₄NO₃的用量；附加成分由激素、蔗糖和固化劑組成。其中激素包括細胞分裂素和生長素兩種，采用6-BA(芐氨基腺嘌呤)、TDZ(噻苯隆)作為細胞分裂素，NAA(萘乙酸)和IBA(吲哚乙酸)作為生長素，多種成分綜合使用，得到一種適用多種楊樹品種(如楊樹雜交種、遼楊、毛新楊和新疆楊)的通用培養基。

進一步地，所述通用培養基中6-BA的濃度為0.3mg/L，NAA的濃度為0.05mg/L，TDZ的濃度為0.001mg/L，蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為5.5g/L。

為保證楊樹擴繁的正常進行，所述通用培養基的pH值為5.8-6.2。

作為一種保持通用培養基pH值的方法，在所述通用培養基中加入pH緩沖劑。

本發明還提供了一種使用所述通用培養基的快速擴繁方法，包括以下步驟：

A、原料準備：取楊樹莖段并做滅菌處理，得脫毒莖段；

B、增殖繼代培養，在無菌條件下，將步驟A中得到的所述脫毒莖段接種在所述通用培養基上，并置于22-28℃的黑暗條件下培養7-10天后，轉入22-28℃的光照條件下培養20-40天，光照強度為1600-2000Lux，每天光照時間為10-16小時；即可得到楊樹幼苗。

使用所述通用培養基的快速擴繁方法，操作程序簡便，無需分別單獨制作培養基，使復雜生產工序簡化，工藝成本降低，經濟效益增加。

為了促使楊樹幼苗更好地生根，優選的技術方案是，增殖繼代培養之后還包括C、生根培養：取步驟B得到的楊樹幼苗頂端3-5cm的部分，接種在生根培養基上，并置于22-28℃的光照條件下培養30-40天，光照強度為1600-2000Lux，每天光照時間為10-16小時；即可得到帶有根的楊樹幼苗。

為了使楊樹苗迅速適應陸地的環境條件，優選的技術方案是，生根培養之后還包括D、煉苗移栽：將步驟C得到的根系達2-3cm的楊樹苗進行煉苗移栽。

所述生根培養基是使用1/2MS培養基為基礎，并添加蔗糖、IBA和瓊脂得到，所述生根培養基中蔗糖的濃度為30g/L，IBA的濃度為0.5mg/L，瓊脂的濃度為5.5g/L。

在步驟A中，取楊樹半木質化嫩枝，去除葉片以及頂芽，依次使用洗滌劑溶液、酒精溶液和氯化汞溶液沖洗后，吸干楊樹莖段表面水分后得到脫毒莖段。

進一步地，所述酒精溶液的體積分數為75％，所述氯化汞溶液的中氯化汞的質量分數為0.1％；在酒精溶液和0.1％的氯化汞溶液沖洗后，均使用無菌水對所述楊樹莖段進行沖洗。

本發明的有益效果為：