[發明專利]風熱感冒顆粒HPLC特征圖譜的構建方法

有效

• 申請號: 201610947349.5
• 申請日: 2016-10-26
• 公開（公告）號: CN106645508B
• 公開（公告）日: 2018-12-14
• 發明（設計）人: 吳萍;李雙;白冰;徐建
• 申請（專利權）人: 吉林修正藥業新藥開發有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王學強

一種風熱感冒顆粒HPLC特征圖譜的構建方法，包括下述步驟（1）參照物溶液的制備：精密稱取牛蒡苷對照品適量，加30~70%甲醇制成每1ml含牛蒡苷60~80μg的溶液，即得。（2）供試品溶液的制備:取風熱感冒顆粒，研細，取約1~3g，精密稱定，（3）色譜條件：采用ZORBAX SB?C18色譜柱；流動相為以乙腈?0.1％磷酸溶液為5~45：95~55的混合溶液；流速為0.5～1.5ml/min；DAD檢測器，檢測波長為205～285nm；柱溫25～45℃，理論板數均不低于10000。（4）測定：分別精密吸取參照物溶液和供試品溶液各5～20μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到風熱感冒顆粒的HPLC特征圖譜，本發明的優點是能有效的監控不同批次間風寒感冒顆粒的質量，方法具有精密度高、重現性好等特點，有利于全面監控產品的質量。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種風熱感冒顆粒HPLC特征圖譜的構建方法。

背景技術

風熱感冒顆粒為臨床常用中藥復方制劑，由板藍根、連翹、薄荷、荊芥穗、桑葉、蘆根、牛蒡子、菊花、苦杏仁、桑枝、六神曲等組成，功能主治為清溫解毒，宜肺利咽。用于感冒身熱，鼻塞，頭痛，咳嗽，多痰。現執行標準收載于中成藥部頒標準，標準編號為WS₃-B-0044-89，標準中僅收載了性狀、溶化性等顆粒劑常規檢查項，由于質量控制水平較低，在藥材投料過程中可能存在少投或以次充好現象，不能保證產品內在質量的均一和療效的穩定，存在質量安全隱患。為了提高風熱感冒顆粒藥品的質量，已經對全方進行了質量檢測方法研究，但因中藥復方制劑中藥味較多成分復雜不易分離鑒定等特點，現有技術檢測均集中為薄層鑒別及含量測定單一指標的研究，僅對風熱感冒顆粒處方中連翹、牛蒡子等個別藥味進行了定性鑒別和定量檢測，由于本品處方藥味較多，難以反映樣品的整體質量。

本發明中我們對風熱感冒顆粒進行了HPLC特征圖譜試驗研究，建立了特征圖譜的質量檢測方法，并對所建立方法進行了精密度、重復性等方法學驗證試驗，結果表明本發明中檢測方法穩定可行。本發明克服了風熱感冒顆粒現在執行標準中缺少質量檢測方法的不足，以及現有技術中檢測方法指標針對性強、覆蓋面小的片面性，建立起的特征圖譜可全面反映風熱感冒顆粒復雜的化學成分及其相對比例，是一種符合中藥復方特色的質量控制模式，可有效地表征藥品質量。

發明內容

本發明的目的之一是提供中成藥風熱感冒顆粒的HPLC特征圖譜的構建方法，該方法包括以下步驟：

(1)參照物溶液的制備：精密稱取牛蒡苷對照品適量，加30～70％甲醇制成每1ml含牛蒡苷60～80μg的溶液，即得。

(2)供試品溶液的制備:取風熱感冒顆粒，研細，取約1～3g，精密稱定，精密加入30～70％甲醇25～75ml，稱定重量，超聲處理15～45分鐘，待溶液冷卻至室溫，用30～70％甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.22～0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。

(3)色譜條件：采用ZORBAX SB-C18色譜柱(柱長為250mm，內徑為4.6mm，粒徑為5μm)；流動相為以乙腈-0.1％磷酸溶液為5～45：95～55的混合溶液；流速為0.5～1.5ml/min；DAD檢測器，檢測波長為205～285nm；柱溫25～45℃，理論板數均不低于10000。

(4)測定：分別精密吸取參照物溶液和供試品溶液各5～20μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到風熱感冒顆粒的HPLC特征圖譜。

本發明的HPLC特征圖譜的最佳構建方法如下：

優選地，步驟(1)所述參照物溶液濃度為每1ml含牛蒡苷對照品70μg的50％甲醇溶液。

優選地，步驟(2)所述供試品溶液的制備步驟如下：取風熱感冒顆粒，研細，取約2g，精密稱定，精密加入50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，待溶液冷卻至室溫，用50％甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.22～0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。