[發明專利]一種長瓣兜蘭種子低溫處理后的組培育苗方法

在審

• 申請號: 201610945621.6
• 申請日: 2016-10-26
• 公開（公告）號: CN107980621A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發明（設計）人: 鄧克云;鄧克蘭;劉森銀;周麗
• 申請（專利權）人: 黔西南州綠緣動植物科技開發有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所52100
• 代理人: 吳無懼

技術領域

本發明涉及一種長瓣兜蘭種子低溫處理后的組培育苗方法，屬于組培苗的培育技術領域。

背景技術

長瓣兜蘭（學名：Paphiopedilum concolor），蘭科，兜蘭屬附生植物。葉基生；數枚至多枚，葉片帶形、革質。花葶從葉叢中長出，花苞片非葉狀；子房頂端常收狹成喙狀；花大而艷麗，有種種色澤；中萼直立，花粉粉質或帶粘性，退化雄蕊扁平；柱頭肥厚，下彎，柱頭面有乳突，果實為蒴果。7-9月開花，11月結果。長瓣兜蘭姿態美觀，花形優雅，為觀賞花卉之上品，是中國僅有的幾種多花性兜蘭之一，屬國家一級保護植物，也是育種專家作為雜交育種的優秀親本之一。

由于長瓣兜蘭花后結果率極低，所以長瓣兜蘭的種子彌足珍貴，在采用其種子來進行組培育苗繁育時，由于采用的培養基配比參數很難掌控、甚至配比參數不合理，導致長瓣兜蘭在組培過程中萌發率低，種苗生根率低，生長緩慢，成活率低，制約著長瓣兜蘭的人工繁育。因此，提供一種長瓣兜蘭種子低溫處理后的組培育苗方法具有重要意義。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：提供一種長瓣兜蘭種子低溫處理后的組培育苗方法，以解決長瓣兜蘭種子發芽率低、種苗生根率低、生長緩慢的問題，加快長瓣兜蘭種苗的生長繁殖，滿足大規模種植長瓣兜蘭的需要。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種長瓣兜蘭種子低溫處理后的組培育苗方法，包括以下步驟：

（1）長瓣兜蘭種子低溫處理：在結果期，將采集的長瓣兜蘭種子放在種子低溫儲藏柜中保存，保存溫度4℃，保存3~4個月；

（2）長瓣兜蘭種子消毒處理：將低溫保存的長瓣兜蘭種子進行消毒處理；

（3）種子萌發培養：將經過消毒處理的長瓣兜蘭種子進行種子萌發培養，種植萌發采用的培養基為1/2MS+20g/L蔗糖+20ml/L椰乳+0.1mg/LKT+ 0.3mg/L活性炭+20g/L土豆+6-7g/L瓊脂粉，PH5.5，暗培養30-60天，培養溫度25±1℃；

（4）原球莖培養：將種植萌發得到的原球莖進行培養，原球莖培養采用的培養基為1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+ 6-7g/L瓊脂粉，PH5.5，光照培養12hr/d，光照強度為1500-1200LUX，培養溫度25±1℃；

（5）生根培養：在生根培養階段采用的培養基為1/2MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LNAA+0.1mg/LBA+20g/L土豆+20g/L香蕉+0.3mg/L活性炭+6-7g/L瓊脂粉，PH5.5，光照培養12hr/d，光照為1500-1200LUX，培養溫度25±1℃；

（6）試管苗移栽。

優選的，步驟（2）長瓣兜蘭種子消毒處理的具體步驟為：A、先用0.1%升汞浸泡10分鐘后，之后用無菌水沖洗；B、再用0.1%次氯酸納浸泡5分鐘后用無菌水沖洗。

優選的，步驟（6）試管苗移栽的條件為：生根培養60-90天后，再煉苗7-15天，用0.1%甲基托布津浸泡15鐘后移栽，室溫度10-28℃，濕度80%-89%，遮陰60-70%。

與現有技術相比，本發明的有益效果如下：

長瓣兜蘭種子經過低溫貯藏，打破了種子休眠，使得種子內部激素類信號物質增加，可以促進種子萌發。在長瓣兜蘭進行低溫處理后進行組培育苗的各個階段中，采用了適于長瓣兜蘭組培的培養基，在所使用的培養基中添加有土豆以及活性炭成分，土豆成分可以為在對長瓣兜蘭種子萌發提供豐富的淀粉、蛋白質、粗纖維等營養物質，提高了長瓣兜蘭種子發芽率和種苗生根率，另外活性炭成分可以為長瓣兜蘭種子萌發提供暗環境，吸附離體培養中的酚類物質等抑制物，使多酚氧化酶與過氧化物酶失活，防止褐變現象，同時活性炭對高質量濃度的IAA、NAA以及BA、KT等也產生吸附作用，從而可以長瓣兜蘭發芽率高以及后續種苗生根率。另外，在種子萌發培養采用的培養基中含有椰乳成分，椰乳在對長瓣兜蘭愈傷組織份分化率和芽高均有促進作用，可以使組培苗增粗變壯，提高了長瓣兜蘭種子萌發率。

具體實施方式

下面結合具體的實施例對發明進行進一步介紹：

一種長瓣兜蘭種子低溫處理后的組培育苗方法，包括以下步驟：

（1）長瓣兜蘭種子低溫處理：在結果期，將采集的長瓣兜蘭種子放在種子低溫儲藏柜中保存，保存溫度4℃，保存3~4個月；

（2）長瓣兜蘭種子消毒處理：將低溫保存的長瓣兜蘭種子進行消毒處理；