[發明專利]一種非水蒸汽蒸餾法測定煙堿含量的方法

在審

• 申請號: 201610935348.9
• 申請日: 2016-11-01
• 公開（公告）號: CN106596423A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 王瑩;陳平;何際芳;楊海朝;張明璐;孫義安;劉鳳霞;薛剛;馬盼盼
• 申請（專利權）人: 河南順天生物科技有限公司;南陽理工學院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 鄭州紅元帥專利代理事務所(普通合伙)41117
• 代理人: 秦舜生

技術領域

本發明涉及煙草行業煙堿含量的測定領域，具體的說是涉及一種非水蒸汽蒸餾法測定煙堿含量的方法。

背景技術

煙堿俗稱尼古丁，屬于吡啶族生物堿，是煙草中的特有成分。隨著近年來醫藥、煙草行業、農業、化工等諸多領域的迅速發展，市場上對天然煙堿的需要量與日俱增。快速、簡便、準確地測定煙堿樣品及煙堿制品中煙堿的含量是企業生產所必需的。現有的煙堿分析檢測方法有重量分析法、滴定分析法、旋光法、紅外光譜定量分析法、原子吸收分光光度法、色譜分析法、電位分析法、極譜分析法等，而這些方法各有利弊。

《GB/T 23226-2008卷煙總粒相物中總植物堿的測定光度法》、《YCT34-1996煙草及煙草制品總植物堿的測定光度法》這些標準都是利用水蒸汽蒸餾的基本原理，將水通入不溶或難溶于水、但有一定蒸汽壓的有機物中，使有機物在低于100℃溫度下，隨水蒸汽一起蒸出來。煙堿能與HCl或H₂SO₄結合生成煙堿鹽(弱堿強酸鹽)而溶于水。在提取液中加入強堿NaOH后可使煙堿游離出來，游離煙堿在100℃左右具有一定的蒸汽壓，隨水蒸汽一起蒸出，被硫酸水溶液吸收。該方法科學合理可行，但分析一個樣品所需時間較長。

發明內容

本專利研究非水蒸氣蒸餾法是依據煙堿的理化性質，采用萃取技術處理樣品后得到適合分析的游離煙堿樣品，直接利用光度法測定，并依據《GB/T23226-2008卷煙總粒相物中總植物堿的測定光度法》的相關公式計算。該方法改進了GB/T 23225-2008中樣品處理的方法，縮短了檢測所需時間，使分光光度法廣泛用于煙葉及粗提物、精品的檢測，更符合工業企業、煙草行業簡便測定煙堿含量。

本發明采用的技術方案：一種非水蒸汽蒸餾法測定煙堿含量的方法，其特征在于按下述步驟操作：

(1)樣品制備

將煙葉或制品放入烘箱中烘干去除水分，取出去梗粉碎，過篩，裝入廣口瓶中密封保存以備用，取一定量的粉末狀樣品，于80℃水浴下用50mL 1mol/L硫酸攪拌浸泡30分鐘，調整溶液的pH值為11，然后進行絮凝脫色除雜處理，脫色除雜后的煙堿溶液經萃取濃縮處理后得到游離煙堿待測樣品；

(2)檢測

在小燒杯中加入6-12mL 1mol/L的硫酸水溶液于分析天平上歸零，然后加入30-60μL游離煙堿稱重(m)，后用250mL容量瓶定容，測定時稀釋5-10倍(F)，利用分光光度計在259、236、282nm波長處測定吸光度，259波長處的A<0.7；

(3)煙堿含量的計算

所述煙堿含量的計算方法為：

式中：X—煙堿含量；

1.059—校正系數；

F—產品的稀釋倍數；

A₂₃₆、A₂₅₉、A₂₈₂—吸光度值的實測值；

34.3—煙堿在水溶液中的比消光系數；

W—試樣水分含量(本發明計算中含水量按0計算)；

m—樣品的質量(g)。

優選的，取樣量為0.5-1克。

優選的，所述樣品為高純度游離煙堿，直接按步驟(2)和(3)進行檢測和計算。

通過本發明方法，對樣品加量的確定：

通過改變樣品加樣量，對煙堿回收率的影響來確定水汽蒸餾法適用的樣品范圍，進而對非水汽蒸餾法樣品加量進行優化。分別取30μL、40μL、50μL、60μL、70μL的98％煙堿標準品(游離煙堿)。按本發明所述方法進行檢測，計算回收率。不同加樣量下98％煙堿的回收率如表1所示。

表1不同樣品加量下98％煙堿的回收率

由試驗可以看出，在其它條件不變的情況下，樣品量在30-60μL范圍內的回收率在99-101％，方差分析及顯著性檢驗30-60μL范圍內不顯著，說明非水汽蒸餾法在這個范圍內的測定是準確的、可重復的。

2、硫酸吸收液的體積的確定

通過1mol/L的硫酸作吸收液，對煙堿回收率的影響來確定非水汽蒸餾法適用的硫酸加量，進而對非水汽蒸餾法樣品加量進行優化。按本發明所述方法進行檢測，計算回收率。在不同體積的硫酸吸收液下煙堿回收率如表2所示。

表2不同硫酸體積吸收液下98％煙堿的回收率

由試驗可以看出：在其它條件不變的情況下，隨著硫酸體積的增加煙堿回收率在6-12mL 1mol/L硫酸作吸收液時煙堿回收率為100％左右。