[發(fā)明專利]復(fù)鑒藍(lán)盾-E系列微量DNA提取試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610929813.8
• 申請(qǐng)日: 2016-10-31
• 公開（公告）號(hào): CN108018282A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚均;湯真
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海復(fù)鑒生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/10
• 分類號(hào): C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種微量DNA提取、純化試劑盒，運(yùn)用直接裂解法提取DNA，通過直接破壞并釋放細(xì)胞中DNA的方法，對(duì)各類生物檢材上極微量的DNA進(jìn)行快速、高效地提取和純化。本發(fā)明確定了穩(wěn)定有效的DNA提取純化試劑和操作方法，并提供了詳細(xì)的操作流程。本試劑盒包括微量DNA提取和純化試劑及其操作方法。該試劑盒的操作簡便，僅需要4個(gè)步驟，可以對(duì)各類檢材進(jìn)行微量DNA進(jìn)行提取，而且在復(fù)旦大學(xué)現(xiàn)代人類學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和各地公安機(jī)關(guān)法醫(yī)學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行結(jié)果印證。在微量DNA提取和純化方面可以得到廣泛的應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種試劑盒，尤其涉及微量DNA提取、純化的試劑盒。

背景技術(shù)

目前微量DNA提取方法包括chelex100法、硅珠法、磁珠法等各類方法。硅珠法的主要原理是通過DNA與二氧化硅之間特異性吸附完成DNA的提取純化，提取靈敏度與純度較高，但在DNA提取純化過程中受移管、試劑劑量、漂洗步驟、洗脫體積等的影響，在處理微量物證方面效果欠佳；而chelex 100采用利用核酸和蛋白質(zhì)對(duì)酚和氯仿變性作用的反應(yīng)性不同分離核酸與蛋白質(zhì)，其原理簡單并且操作便捷，單其所提取的DNA雜質(zhì)較多，對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)分析不利；磁珠法則是通過磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識(shí)別和高效結(jié)合提取純化DNA，其提取DNA純度高且污染低，然而繁瑣的步驟導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)整體耗時(shí)較長，降低工作效率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種快速、高效且無損地從生物檢材中提取、純化極微量的DNA的試劑盒。

一種微量DNA提取、純化試劑盒，運(yùn)用直接裂解法提取DNA，通過直接破壞并釋放細(xì)胞中DNA的方法，對(duì)各類生物檢材上極微量的DNA進(jìn)行快速、高效地提取和純化。本發(fā)明確定了穩(wěn)定有效的DNA提取純化試劑和操作方法，并提供了詳細(xì)的操作流程。

本試劑盒包括微量DNA提取和純化試劑及其操作方法。該試劑盒的操作簡便，僅需要4個(gè)步驟，可以對(duì)各類檢材進(jìn)行微量DNA進(jìn)行提取，而且在復(fù)旦大學(xué)現(xiàn)代人類學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和各地公安機(jī)關(guān)法醫(yī)學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行結(jié)果印證。在微量DNA提取和純化方面可以得到廣泛的應(yīng)用。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的試劑盒整體包裝示意圖

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

1.試劑盒制作流程：

配制Buffer I→包裝

配制BufferII→包裝

配制Buffer III→包裝

2.試劑盒的組成：

Buffer I 10ml

Buffer II 40ml

Buffer III 2ml

實(shí)施例二：

試劑盒使用方法：

1.儀器要求：金屬溫浴設(shè)備，離心機(jī)

2.標(biāo)本要求：毛發(fā)、棉簽等各類檢材

3.穩(wěn)定性與保存：

本試劑盒中Buffer I及Buffer II需在-20℃條件下保存，其穩(wěn)定貯存時(shí)間至少為一年，Buffer III在4℃條件下可穩(wěn)定貯存至少一年。

4.操作程序：

1.將檢材放入離心套管，加入100-200μl Buffer I，靜置1min，65℃孵育10min；

2. 95℃孵育2min，離心去除套管；