[發(fā)明專利]一種利用兩種深度共熔溶劑分步預(yù)處理以提高水稻秸稈中纖維素酶解效率的綠色方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610929252.1
• 申請日: 2016-10-31
• 公開（公告）號: CN106755189B
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 侯雪丹;黃超梅;葉梅;林凱鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/02
• 代理公司: 廣東廣信君達(dá)律師事務(wù)所 44329
• 代理人: 張燕玲;楊曉松

1.一種利用兩種深度共熔溶劑分步預(yù)處理以提高水稻秸稈中纖維素酶解效率的綠色方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)將水稻秸稈經(jīng)干燥后，粉碎成平均粒徑為150～350μm的水稻秸稈粉；

(2)以深度共熔溶劑A為預(yù)處理溶劑，將質(zhì)量比為1:5～1:25的水稻秸稈粉和深度共熔溶劑A混合，于80～130℃下攪拌2～6小時，隨后冷卻至室溫，加入1～3倍深度共熔溶劑A體積的溫水，過濾、洗滌濾渣，干燥后獲得預(yù)處理后的水稻秸稈；將經(jīng)過深度共熔溶劑A預(yù)處理后的水稻秸稈與深度共熔溶劑B混合，同樣于80～130℃下攪拌2～6小時，隨后冷卻至室溫，加入1～3倍深度共熔溶劑B體積的溫水，過濾、洗滌濾渣，干燥后獲得最終的水稻秸稈樣品；所述深度共熔溶劑B的質(zhì)量與深度共熔溶劑A的質(zhì)量相同；

所述的深度共熔溶劑A包括摩爾比為1：3的蘋果酸和脯氨酸，或者摩爾比為1：2的氯化膽堿和尿素，或者摩爾比為2：1的氯化膽堿和草酸；所述的深度共熔溶劑B包括摩爾比為1：3的蘋果酸和脯氨酸，或者摩爾比為1：2的氯化膽堿和尿素，或者摩爾比為2：1的氯化膽堿和草酸；所述深度共熔溶劑A和深度共熔溶劑B是不同物質(zhì)；

(3)稱取步驟(2)最終獲得的水稻秸稈樣品，按照固液比為1～5mg/mL加入檸檬酸鹽緩沖液，再按照6～20U/mg水稻秸稈樣品的比例加入商品化纖維素酶，在轉(zhuǎn)速為150～250r/min以及溫度為40～60℃的條件下進(jìn)行反應(yīng)，測定水解液中葡萄糖濃度，直至水解液中葡萄糖濃度不再變化，終止反應(yīng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用兩種深度共熔溶劑分步預(yù)處理以提高水稻秸稈中纖維素酶解效率的綠色方法，其特征在于：步驟(3)中所述的檸檬酸鹽緩沖液的濃度為50mmol/L，其pH值為4.8。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用兩種深度共熔溶劑分步預(yù)處理以提高水稻秸稈中纖維素酶解效率的綠色方法，其特征在于：步驟(3)中所述的商品化纖維素酶是來源于里氏木霉Trichoderma reesei的纖維素酶。