[發(fā)明專利]一株對蠐螬幼蟲高致病力的球孢白僵菌菌株及其應(yīng)用

在審

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• 申請日: 2016-10-31
• 公開（公告）號: CN106834130A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李嬌嬌;杜婧;邱磊;李敬龍
• 申請（專利權(quán)）人: 齊魯工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P7/04;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于害蟲生物防治領(lǐng)域，涉及一株球孢白僵菌及其應(yīng)用，具體涉及一株對蠐螬具有高致病力的球孢白僵菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

蠐螬,為鞘翅目金龜甲的幼蟲，別名核桃蟲、白土蠶，是國內(nèi)外公認(rèn)難于測報(bào)和防治的重大土棲性害蟲。其種類多達(dá)30000余種,我國目前已記錄約1800種,植物地下部受害的86%是由蠐螬造成。

蠐螬食性雜、食量大，棲息于地下，具有隱蔽性和滯后性，時(shí)常造成根莖嚴(yán)重受損，植株萎蔫死亡，農(nóng)作物減產(chǎn)甚至絕收。近幾年隨著種植結(jié)構(gòu)調(diào)整和大面積保護(hù)性耕作體制的快速發(fā)展，許多地區(qū)的蠐螬蟲口密度不斷上升，危害程度加重，為害規(guī)律有所改變，為害損失逐年加劇。由于蠐螬的生物習(xí)性和生活環(huán)境特點(diǎn)，使化學(xué)農(nóng)藥的施用和防治效果受到限制，而且頻繁使用化學(xué)農(nóng)藥造成的殘留問題、環(huán)境污染問題已引起各界人士擔(dān)憂。因此，防治蠐螬的難度比較大。

目前，對于蠐螬的防治主要采用物理、化學(xué)和生物防治。在物理防治上，可采用燈光誘捕成蟲、翻耕拾撿幼蟲、適時(shí)澆水處理等措施，不但浪費(fèi)勞動力，且見效慢。在化學(xué)防治上，曹耿全等人（蠐螬對花生的為害特點(diǎn)及防治措施.安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2004，10（2）:66）一直主要依靠化學(xué)殺蟲劑辛硫磷，多屬于中高毒性，以直接灌溉或藥劑拌撒的方式進(jìn)行防治，不但在土壤滲透過程中有許多不確定的因素，造成投入成本高、污染環(huán)境的問題，而且出現(xiàn)蠐螬產(chǎn)生抗藥性、作物產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)等問題。在生物防治上，利用昆蟲病原真菌可作為控制花生蠐螬的安全方法和有效途徑，張冰等人（綠僵菌防治高爾夫草坪蠐螬試驗(yàn)[J].草業(yè)科學(xué)，2008，（11）：125-128）利用綠僵菌分生孢子對蠐螬進(jìn)行防治,但是由于防治效果的不穩(wěn)定性和緩效性,而限制了它的廣泛應(yīng)用。宋益良等人（吉林乳狀菌的分離與防治大黑金龜幼蟲試驗(yàn)初報(bào)[J]．吉林農(nóng)業(yè)科學(xué)，1983，2:64-68）報(bào)道了利用乳狀菌對蠐螬進(jìn)行防治，由于環(huán)境因素影響，乳狀菌對蠐螬的致病作用非常緩慢，通常需要幾個月或一年以上，效果并不明顯。

目前雖然已有一些關(guān)于綠僵菌菌株的篩選和田間防治效果的報(bào)道，其穩(wěn)定性和時(shí)效性較差。但利用球孢白僵菌對蠐螬進(jìn)行防治的報(bào)道很少，缺乏一種穩(wěn)定優(yōu)良性狀的白僵菌菌株，嚴(yán)重影響了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的效益和農(nóng)作物的產(chǎn)業(yè)化推進(jìn)。此外，白僵菌具有易培養(yǎng)、易儲藏、施用簡便等優(yōu)點(diǎn)，而且在土壤中的存活時(shí)間較長，用它防治地下害蟲，不僅在防治期間效果明顯，而且殘效期長，所以利用白僵菌來控制地下害蟲危害的潛力很大。因此，篩選對蠐螬高致病力的球孢白僵菌菌株是一項(xiàng)重要的基礎(chǔ)研究工作，使之能夠在土壤中存活定殖并融入生態(tài)環(huán)境中，建立起可持續(xù)控制蠐螬的生態(tài)機(jī)制。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服缺乏優(yōu)良的白僵菌菌株而限制了對蠐螬的生物防治，本發(fā)明的首要目的是提供一株對蠐螬具有高致病力的球孢白僵菌菌株。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述球孢白僵菌菌株在防治蠐螬方面的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一株對蠐螬具有高致病力的球孢白僵菌菌株菌株為球孢白僵菌（Beauveria bassiana）BbQLU1，已于2015年11月30日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC），保藏編號：CGMCC NO.11618。

該球孢白僵菌菌株BbQLU1具有以下特征：

在SDAY培養(yǎng)基上25～28℃條件下生長4～5天，菌落的平均直徑17mm,16天后達(dá)到65mm。菌落初期為乳白色絨毛狀，后期有淡黃色粉狀孢子層呈中心凸起狀態(tài)。分生孢子多數(shù)近似為球形，少數(shù)為卵圓形，透明光滑，平均大小為2.67（2.26～4.38）×1.86（1.54～2.49）μm。

本發(fā)明所提供的或所述的菌劑可用于防治蠐螬幼蟲。

本發(fā)明所提供球孢白僵菌（Beauveria bassiana）BbQLU1對蠐螬幼蟲具有較強(qiáng)的侵染致病能力。實(shí)驗(yàn)室采用體壁侵染的方法，將一組30～40頭一齡蠐螬幼蟲在30ml 10⁸個孢子/ml的懸液中浸漬10s，并以0.02%吐溫-80的浸漬作為空白對照。每組幼蟲置于直徑15cm的大號培養(yǎng)皿中，在25℃和12:12h條件下保持50天，每隔一天觀察記錄死亡數(shù)，各處理重復(fù)3次。統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)期間處理組和對照組蠐螬的累計(jì)死亡數(shù)量，計(jì)算半致死時(shí)間LT_5O，評估防治效果。