[發明專利]一種多肽及其在制備治療和預防腫瘤的藥物中的應用

有效

• 申請號: 201610921217.5
• 申請日: 2016-10-21
• 公開（公告）號: CN107056887B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 胡卓偉;花芳;李珂
• 申請（專利權）人: 胡卓偉
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K38/08;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;沈佳麗

本發明公開了一種特異性結合TRB3的多肽及其在制備治療和預防腫瘤的藥物中的應用。所述多肽的氨基酸序列如將序列表SEQ ID No.8所示的氨基酸序列中的兩個或兩個以上的氨基酸替換為使其他側鏈相連的非天然氨基酸所示。所述多肽能夠特異性地與TRB3結合，從而阻斷TRB3和P62蛋白的相互作用，因此應用于治療和預防腫瘤的藥物的制備中。所制備的藥物在治療腫瘤疾病中，具有療效顯著，毒副作用少，使用安全的優點。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種多肽及其在制備治療和預防腫瘤的藥物中的應用。

背景技術

TRB3(Tribbles Homologue 3)是Tribbles同源蛋白家族成員之一，參與調節發育過程中細胞的增殖、遷移及形態形成。TRB3作為假激酶蛋白家族成員，具有接頭蛋白樣的功能，參與多種蛋白復合體的組裝。多項研究認為，TRB3可以與多種轉錄因子、泛素連接酶、細胞膜上II型BMP受體以及MAPK、PI3K信號通路成員蛋白發生相互作用，參與糖脂代謝、脂肪細胞分化、凋亡和應激等的調控。近來，多種證據表明，TRB3在多種腫瘤細胞系和人腫瘤組織中呈現高表達，并且在腫瘤的發展過程中發揮重要的促進作用。研究發現，TRB3通過與自噬貨車蛋白p62發生相互作用，抑制細胞的自噬活性，促進腫瘤細胞的增殖和轉移。由此可見，靶向TRB3與p62之間的相互作用是治療腫瘤的一個潛在靶點。因此，研究和開發阻斷TRB3與P62蛋白相互作用的物質，具有很好的抑制腫瘤發生和發展的成藥前景。

蛋白-蛋白相互作用(PPIs)在許多生物過程中扮演著重要的角色，例如細胞的增殖、生長、分化及程序性死亡。人類疾病中許多潛在的治療靶標主要是蛋白-蛋白相互作用。在蛋白-蛋白相互作用的過程中，α螺旋和β折疊二級結構是參與PPIs的主要接觸面單元。近年來，用化學合成方式得到高活性、高選擇性的合成多肽類藥物已經成為新的研究熱點。然而，多肽與作用蛋白的結合能力非常弱，普通的線性多肽不能透過細胞膜且易被蛋白酶水解。因此，多肽類靶點藥物目前還有很多不足。由上可知，亟待獲得靶向TRB3與p62之間的相互作用的，高活性、高選擇性的合成多肽類藥物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對目前缺乏靶向TRB3與p62之間的相互作用的，高活性、高選擇性的合成多肽類藥物的現狀，提供一種特異性結合TRB3的多肽及其在制備治療和預防腫瘤的藥物中的應用。

本發明的發明人經過深入的研究和反復的試驗發現，靶向TRB3與p62蛋白相互作用的多肽A2(氨基酸序列參見序列表SEQ ID No.8)與TRB3的特異性結合能力和生物穩定性都比較低。而其與多肽A2在溶液中不能穩定形成活性所需的α螺旋構象直接相關。由此，發明人進行了針對性的研究和試驗，發現如果將多肽A2中特定位置的氨基酸殘基替換為側鏈可以相連的非天然氨基酸，如S-戊烯丙氨酸(S5)，則改造后的多肽具有穩定的α螺旋的二級結構，使改造后的多肽具有極高的親和力、抗酶解穩定性以及細胞穿膜性，即提高其α螺旋穩定性、TRB3結合能力和代謝穩定性，抑制多種腫瘤細胞增殖和轉移。經實驗驗證，改造后的多肽能夠應用于制備治療和預防腫瘤的藥物中。基于發明人的研究工作，本發明提供下述的技術方案。

本發明提供的技術方案之一是：一種特異性結合TRB3的多肽，所述多肽的氨基酸序列如將序列表SEQ ID No.8所示的氨基酸序列中的兩個或兩個以上的氨基酸替換為側鏈可相連的非天然氨基酸所示。

所述的使其他側鏈相連的非天然氨基酸為本領域常規的非天然氨基酸，較佳的為S-戊烯丙氨酸(S5)。

較佳的，所述的多肽中，所述替換的氨基酸的數目為兩個且所述替換的氨基酸的位置分別為第i位和第i+3位，或者，為第i位和第i+4位，其中1≤i≤7，i為正整數。

更佳的，所述的多肽的氨基酸序列如將序列表SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ IDNo.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6和SEQ ID No.7中任一項所示。